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免费代测人CC趋化因子配体5ELISA 检测试剂盒使用的实验方案

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本试剂仅供研究使用  标本:血清

或血浆

上海抚生实业有限公司专业供应葡聚糖凝胶HL-20,白介素elisa试剂盒,肿瘤坏死因子elisa试剂盒,人类白介抗原B27,细胞生长因子试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量100%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换 
 
试验原理:
    RANTES/CCL5试剂盒是固

相夹心法酶联免疫吸附实验

(ELISA).已知RANTES/CCL5浓度

的标准品、未知浓度的样品加入微

孔酶标板内进行检测。先将

RANTES/CCL5和生物素标记的抗体

同时温育。洗涤后,加入亲和素标

记过的HRP。再经过温育和洗涤,

去除未结合的酶结合物,然后加入

底物A、B,和酶结合物同时作用。

产生颜色。颜色的深浅和样品中

RANTES/CCL5的浓度呈比例关系。
 
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体,请尽快用水

冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆

品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份

。

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前

恢复到室温。稀稀过后的标准品应

丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装

袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。保质前

使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,

吸取终止液和底物A、B液时,避免

使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成

份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将

吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水

。
底物A应挥发,避免长时间打开盖

子。底物B对光敏感,避免长时间

暴露于光下。避免用手接触,有毒

。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所

有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的

量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细

胞刺激。使用不含热原和内毒素的

试管。收集血液后,1000×g离心

10分钟将血清和红细胞迅速小心地

分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素

血浆可用于检测。1000×g离心30

分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟

去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生

理盐水捣碎。1000×g离心10分钟

,取上清液
保存------如果样品不立即使用,

应将其分成小部分-70 ℃保存,避

免反复冷冻。尽可能的不要使用溶

血或高血脂血。如果血清中大量颗

粒,检测前先离心或过滤。不要在

37℃或更高的温度加热解冻。应在

室温下解冻并确保样品均匀地充分

解冻。
 
操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不

要使液体产生大量的泡沫,以免加

样时加入大量的气泡,产生加样上

的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数

量决定所需的板条数。每个标准品

和空白孔建议做复孔。每个样品根

据自己的数量来定,能使用复孔的

尽量做复孔。标本用标本稀释液1

:1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应

孔、加入待测样品50ul于反应孔内

。立即加入50ul的生物素标记的抗

体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37

℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,

振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸

拍干。重复此操作3次。如果用洗

板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,

轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,

振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸

拍干。重复此操作3次。如果用洗

板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振

荡混匀,37℃温育10分钟。避免光

照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液

,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
6号标准品以上的结果为非线性的

,根据此标准曲线无法得到精确的

结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1

号标准品。稀释度的线性。样品线

性回归与预期浓度相关系数R值为

0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反

应。
3. 重复性:板内、板间变异系数

均小于10%。

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪

上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),

相应的RANTES/CCL5标准品浓度为

横坐标(X),做得相应的曲线,

样品的RANTES/CCL5含量可根据其

OD值由标准曲线换算出相应的浓度

。

3、检测值范围:0-4.0ng/ml

4、敏感度: 0.01 ng/ml
IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白

细胞介素-18/干扰素γ诱导因子抗

体 0.2ml
IL-20(Interleukin-20) 白细胞介

素-20抗体 0.2ml
IL-23(Interleukin-23) 白介素-

23抗体 0.2ml
IL-23R(Interleukin-23

receptor) 白介素-23受体抗体 

0.2ml
IL-19/NG.1(Interleukin-19) 白

细胞介素-19抗体 0.2ml
IL-20Rα/IL20RA(Interleukin-

20 receptor alpha chain

precursor) 白介素20受体α链抗

体 0.2ml
IL-20RB/IL-20R2(Interleukin-

20 receptor subunit beta) 白

介素20受体β链抗体 0.2ml
Goat anti-Guinea pig IgG/Gold

金标记羊抗豚鼠IgG (10nm/15nm) 

1ml
Goat anti-rabbit IgG/Glod 金标

记羊抗兔IgG(10nm/15nm) 0.5ml
Goat anti-rabbit IgG/Glod 金标

记羊抗兔IgG(10nm/15nm) 1ml
IL-21(Interleukin-21) 白介素21

抗体 0.2ml
IL-21R(Interleukin-21

receptor) 白介素21受体抗体 

0.2ml
IL-22/ZCYTO18(Interleukin-22)

白介素-22抗体 0.2ml
IL-22R/IL22RA1 (Interleukin-22

receptor subunit alpha-1) 白介

素-22受体抗体 0.2ml
IL-22BP/IL22RA2(Interleukin-22

receptor subunit alpha-2) 白介

素22受体结合蛋白抗体 0.2ml
IL1RAPL1 (Interleukin 1

receptor accessory protein-

like 1) 白介素受体相关蛋白样1

前体蛋白抗体 0.2ml
IL-26/AK155(Interleukin-

26/Protein AK155 ) 白介素26抗

体 0.2ml
Mouse anti-Goat IgM/Gold 金标

记鼠抗羊IgM(10nm/15nm) 2ml

若需要了解试剂盒的详细信息,请来电咨询:联系人:江经理
电话:021-60514051
传真:021-60514051
手机:13524933321
 

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