联系我们
联系人：赵经理
资料下载
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α,小鼠巨噬细胞炎性蛋白1αELISA试剂盒,小鼠elisa试剂盒实验操作
详细内容下载：
文件大小：36kb
上传时间：2012/8/31 10:47:51
文件类型：jpg
上 传 者：上海沪宇生物科技有限公司
查看次数：365次
下载次数：98次
小鼠elisa试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为60ng/L，40ng/L ，20ng/L，10 ng/L， 5ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项：
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
相关文章
- 2013/6/5金鱼阿黑皮素原酶联免疫分析试剂盒使用方法
- 2013/5/29犬细小病毒抗体酶联免疫分析试剂盒使用方法
- 2013/5/22羊组织蛋白酶B酶联免疫分析试剂盒使用方法
- 2013/5/15人血小板膜糖蛋白酶联免疫分析试剂盒使用方法
- 2013/5/8牛促黄体激素酶联免疫分析试剂盒使用说明书
- 2013/4/24呋喃妥因酶联免疫分析试剂盒使用实验原理
- 2013/4/17人核转录因子-κB亚基p65亲和肽酶联试剂盒使用实验原理
- 2013/4/10鸡传染性法氏囊病酶联试剂盒实验原理
- 2013/4/3人水痘带状疱疹病毒酶联免疫分析
- 2013/3/27绵羊肿瘤坏死因子酶联免疫分析
