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大鼠清除受体富含半胱氨酸1型蛋白M,大鼠elisa试剂盒实验操作

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上传时间：2012/10/26 10:13:33

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上传者：上海沪宇生物科技有限公司

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大鼠elisa试剂盒检测步骤：在使用前，将所有试剂和样品室温。再次离心样品解冻后测定前。据建议，所有样品和标准来测定一式两份。
1。准备好所有试剂，工作标准和样品在前面的章节中。
2。请确定井数的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥剂，密封保鲜袋，将未使用的井在4°C的含量布局表
。每孔加入100μl的标准和样品。封面用胶粘带提供。孵育2小时，在37℃下一盘布局记录标准和样品检测。
4。每孔中取出的液体，不洗。
5。向每孔中加入100μl生物素抗体（1倍）。盖上一个新的胶粘带。孵育1小时，在37℃下（生物素抗体（1X）可能会出现混浊。预热至室温，轻轻混匀，直到出现均匀解决方案。）
6。吸液的各孔和洗涤，共洗涤三次重复该过程两次。洗净，每孔填充洗涤缓冲液（200μL）使用喷瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，静置2分钟，彻底清除液体的每一步是必不可少的良好的性能。最后一次洗涤后，清除任何剩余洗涤缓冲液的吸ordecanting。倒置板和涂抹对干净的纸巾。
7。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一个新的粘接剂条。温育1小时，在37℃下
8。重复的愿望/洗涤过程中，在步骤6的5倍。
9。将90μlTMB底物添加到每个孔中。孵育15-30分钟，在37℃下避光
10。一站式解决方案，每孔加入底物，轻轻晃动酶标板，以确保充分混合。
11。在5分钟内，设置至450nm，使用酶标仪测定各孔的光密度。如果波长校正，设置为540 nm或570 nm处。在540 nm或570 nm波长在450 nm处的读数减去读数。该减法校正板的光学缺陷。在450 nm处未经修正读数直接，可能会比较高，不太准确。

特异性：此法具有灵敏度高，特异性好，检测大鼠CD163。观察大鼠CD163及其类似物之间并无重大交叉反应或干扰。
精密度：批内精密度（内检测精度）：CV％<8％
三种已知浓度的样品进行了测试20次在一个平板上进行评估。
间精密度（精密检测间）：CV％<10％
已知的三个样本20检测到的浓度进行了测试评估。