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抗体和重组蛋白的使用及保存方法

点击次数:114 发布时间:2025/10/18 8:26:12

抗体和重组蛋白的使用及保存方法

一、抗体使用规范与保存策略

1. 接收与预处理

离心操作:4℃条件下12,000rpm离心3分钟(体积<50μl需延长至5分钟),确保管壁附着物完全收集

分装原则:按单次使用量分装(≥10μl/份),避免反复冻融导致的活性损失


特殊类型处理:

腹水抗体需立即冻存(含蛋白酶易降解)

荧光标记抗体需全程避光操作


2. 保存条件优化

长期保存:-20℃(普通抗体)或-80℃(珍贵抗体),添加50%甘油可降低冻融损伤

短期保存:4℃不超过2周,置于冰箱内层远离除霜区

防腐措施:0.02%叠氮钠可抑制微生物生长(活细胞实验禁用)


二、重组蛋白使用规范与保存策略

 1. 复溶与稀释

冻干蛋白:使用无菌水复溶,86μl水/100mg冻干粉,轻摇溶解(禁止涡旋)

溶液态蛋白:保持天然构象,避免剧烈震荡导致结构破坏


2. 保存体系构建

温度控制:-80℃保存,添加10-50%甘油增强稳定性

浓度要求:≥1mg/ml以减少管壁吸附损失

速冻技术:液氮速冻后转移至-80℃可最大限度保持活性


三、运输与稳定性保障

对比项

抗体运输要求

重组蛋白运输要求

温度条件

4℃(避免干冰运输)

干冰(保持冷冻态)

冻融控制

≤1次

≤1次

包装要求

冰袋+保温箱

干冰+真空隔热层


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