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抗体和重组蛋白的使用及保存方法
一、抗体使用规范与保存策略
1. 接收与预处理
离心操作:4℃条件下12,000rpm离心3分钟(体积<50μl需延长至5分钟),确保管壁附着物完全收集
分装原则:按单次使用量分装(≥10μl/份),避免反复冻融导致的活性损失
特殊类型处理:
腹水抗体需立即冻存(含蛋白酶易降解)
荧光标记抗体需全程避光操作
2. 保存条件优化
长期保存:-20℃(普通抗体)或-80℃(珍贵抗体),添加50%甘油可降低冻融损伤
短期保存:4℃不超过2周,置于冰箱内层远离除霜区
防腐措施:0.02%叠氮钠可抑制微生物生长(活细胞实验禁用)
二、重组蛋白使用规范与保存策略
1. 复溶与稀释
冻干蛋白:使用无菌水复溶,86μl水/100mg冻干粉,轻摇溶解(禁止涡旋)
溶液态蛋白:保持天然构象,避免剧烈震荡导致结构破坏
2. 保存体系构建
温度控制:-80℃保存,添加10-50%甘油增强稳定性
浓度要求:≥1mg/ml以减少管壁吸附损失
速冻技术:液氮速冻后转移至-80℃可最大限度保持活性
三、运输与稳定性保障
对比项 | 抗体运输要求 | 重组蛋白运输要求 |
温度条件 | 4℃(避免干冰运输) | 干冰(保持冷冻态) |
冻融控制 | ≤1次 | ≤1次 |
包装要求 | 冰袋+保温箱 | 干冰+真空隔热层 |
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