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正确的细胞冻存方法

点击次数:2511 发布时间:2015/6/4 15:28:37
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冯**
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众所周知,细胞是脆弱的。经常有客户反映买了一株细胞回去后实验室培养没几天就反映细胞长势太慢,甚至死亡。到底是培养人员操作问题还是确确实实是厂家提供的细胞质量存在问题?至于后者我们先不追究,对于前者,我司技术人员为你倾情提供正确的细胞冻存方法,希望可以帮助到您!

细胞冻存的方法:
1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。
2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。
3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。
5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。

原创作者:上海劲马实验设备有限公司

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