通过快速分析药物与人血清白蛋白的相互作用来评估先导化合物

                 人血清白蛋白（HSA）在转运药物、代谢物和内源性配体方面起着举足轻重的作用。药物与HSA的结合可以调节游离药物的浓度，可以延长药物起作用的时间，并最终影响药物的吸收、分布、代谢和分泌（ADME）。这些特性使得药物与HSA的结合能力成为药物设计和评价备选药物分子的重要指标 。研究药物和蛋白的结合有很多方法，包括平衡透析、过滤、离心和色谱方法。然而这些方法的解析能力、重复性和通量都很有限。表面等离子体共振（SPR）技术与传统的分析药物-蛋白相互作用的方法相比，有不少优势。它既不需要放射性元素也不需要荧光基团进行标记，就可以测定药物-蛋白相互作用的亲和力、特异性和动力学数据。这意味着所有的化合物都可以拿来分析，而不局限于那些可以加上标记基团的蛋白质。SPR也是一个高度灵敏的技术，样品的消耗远少于传统方法，却可以检测到皮摩级的蛋白和分子量仅有数百Dalton的化合物。它可以得到互作复合物的结合与解离动力学数据，而不像传统的方法只能进行稳态分析。最后一点，SPR可以做到高度自动化和高通量。
 

                 虽然SPR技术已经大量用于测定HSA和药物相互作用的动力学数据，但直到最近，绝大多数实验的动力学数据测定都是顺序分析的。这种分析方式严重限制了药物研发的进度。与之相对照，ProteOnTM XPR36蛋白相互作用阵列系统却可以提供另外一种解决方案，叫做One-shot KineticsTM（一步法动力学）分析 （Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA）。该系统通过一个多通道的SPR装置形成了6 × 6的相互作用阵列，可以实现进样一次即可实现6个配基（Ligand）和6个分析物（Analyte）的相互作用分析，产生36个数据（图1）。多通道分析改善了传统SPR的工作流程，使得生物分子相互作用的定量分析实验可以平行进行。由于多个实验条件可以平行测试，一次实验就可以测试一系列的分析物浓度，从而进行动力学分析。这种平行式的一步分析法可以在单一一块芯片上，通过一次进样，即可得到生物分子间相互作用的详细动力学数据而无需反复再生。