CAS:9068-38-6,AMV反转录酶,

CAS号：9068-38-6 

 

级别：BR

 

来源：纯化的鸟类成髓细胞性白血病病毒（Avian Myeloblastosis Virus）颗粒

浓度：10u/ul 

 

活力定义：一个单位定义为：在37℃，10分钟内催化1nmol dTTP（脱氧核苷酸）掺入到酸不溶物中所需要的酶量。反应条件为：50mM Tris-HCl （pH 8.3，25℃），8.75mM MgCl2，10mM DTT，40mM KCl，10mM DTT，0.1mg/ml BSA，1mM 放射性标记dTTP，0.25mM poly（A）400, 0.25mM oligo（dT）50

 

质量控制测试：活性，SDS-PAGE/纯度，DNase，RNase，核酸内切酶，RT-PCR，cDNA第一链合成

 

产品描述：AMV 逆转录酶催化以DNA、RNA或RNA:DNA杂交体为模板的DNA聚合反应（1）。它需要引物（DNA引物比RNA引物效率更高）以及Mg2+或Mn2+。该酶具有内在的RNase H活性，非离子表面活性剂和氢硫根化合物可在体外增加该酶的活性

 

特点：

 

1.       高浓度产品： Cat.# M9004含有浓度为20-25u/ml的AMV RT 600单位。

 

2.       提供5×反应缓冲液： 250mM Tris-HCl （pH 8.3,25℃）,250mM KCl,50mM MgCl2,2.5mM 精胺,50mM DTT。

 

3.       温度稳定性：由于AMV RT在较高反应温度下较稳定（37-58℃），特别适用于具有复杂二级结构的模板的逆转录

 

储存缓冲液： 200mM 磷酸钾缓冲液（pH 7.2,4℃），0.2% Triton X-100，2mM DTT和50% （v/v）甘油

 

用途：cDNA第一及第二链的合成。引物延伸及RNA测序（2）。RT-PCR，可以将10ml含有AMV RT及反应缓冲液的产物直接加入含Taq DNA聚合酶的50ml PCR反应体系中。如果使用GoTaq DNA Polymerase 或 PCR Master Mix，可以在每50ml PCR反应体系中加入多至25ml RT反应产物

 

性状：悬浮液，由AMV分离而来的分子量约157000道尔顿的α β型全酶。本身具有核糖核酸酶H活性

用途：生化研究。在AMV反转录酶作用下，可以完成由RNA反转录为cDNA的过程，再由优化的U-Taq DNA聚合酶扩增cDNA 

保存：-20℃