脂肪酸甲酯化,植物油中脂肪酸含量,气相色谱分析,检测方案

1.脂肪化学名甘油三酯，脂肪是由甘油和脂肪酸组成的三酰甘油酯，其中甘油的分子比较简单，而脂肪酸的种类和长短却不相同。脂肪酸分三大类：饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸。 脂肪在多数有机溶剂中溶解，但不溶解于水。

2.多不饱和脂肪酸指含有两个或两个以上双键且碳链长度为18～22个碳原子的直链脂肪酸。通常分为omega－3和omega－6，在多不饱合脂肪酸分子中，距羧基最远端的双键在倒数第3个碳原子上的称为omega－3；在第六个碳原子上的，则称为omega－6

3.单不饱和脂肪酸,在分子结构中仅有一个双键；多不饱和脂肪酸,在分子结构中含两个或两个以上双键

脂肪转化为脂肪酸的方法：

1.脂肪在碱性溶液底下水解生成脂肪酸钠，然后加入硫酸，溶于水，不溶于乙醇。无水物是白色晶体或粉末，浓缩把乙醇蒸出，得到脂肪酸

脂肪酸

提取：称200g的海带粉，加入固液比为1:5的乙醇在50℃,500W的条件下用微波法提取，抽滤，取滤液静置，滤渣再加入1:4的乙醇溶剂进行二次提取，提取条件为50℃,500W的条件下进行,提取后抽滤，静置至一段时候后,充分析出白色固体后抽滤进行浓缩,在浓缩前可适当加入甲醇,再经行浓缩

现象:

甲酯化：

酸化甲酯化

1.加入正己烷4 ml，浓度2 mol的氢氧化钾一甲醇溶液2 ml，剧烈振摇1—2 min，30度水浴反应20 min。加入-甲醇溶液，3 000 r／min离心10min。取上清液待测。

其中法能利用快速皂化使脂肪酸盐直接转化成脂肪酸甲酯，减少酸化提取手续

2.取1．3 g浸膏，加0．5mol·L～KOH-CH3OH溶液25 mL，苯一正己烷（体积比为1：1）溶液25 mL，室温下振荡5min后，加热至60℃，处理20 min，冷却后，加入饱和NaCI溶液25 mL，静置分层后取上层清液进行GC—MS分析。

3.样品5 g ，于小烧杯中，加入16.7mL，正己烷8.3mL，使脂肪完全溶解后转入250mL 容量瓶，加入甲醇25mL，再加入0.8mol/L 甲醇-KOH 溶液25mL，摇匀后静置10min。加蒸馏水至刻度，吸取上层溶液，待作GC-MS 分析。

气相条件：进样口温度270℃，温100℃，以10℃/min升到170℃保持1min 后，以3℃/min 升到250℃，保持4min；流速：恒流模式2.4mL/min，分流进样分流比为50:1。测定方法：将沙棘油进行氢氧化钾- 甲醇室温酯化法处理后进样分析，进样量0 . 2μL。按气相条件，用GC-MS 测定样品后得到色谱图。利用气质联用仪所带的标准图谱库的质谱数据进行自动检索，同时根据质谱图及相关文献鉴定出主要色谱峰对应的物质名称，并使用数据处理系统对色谱峰进行面积归一化处理，从而计算出各物质相对含量。

加入3-4滴BF3-溶液，将混合物放置在70℃的水浴中加热3分钟，冷却后，加入1ml正己烷，振摇使甲酯转入正己烷层

4.称取2．0 mg提取出的茶籽油于小样品瓶中，加入1．5 mL正己烷溶解油样，摇匀，加入60“L乙酸甲酯，摇匀静置10 min。用移液枪往每个小瓶中加入100“L 27 mg／mL甲醇钠甲醇溶液，在振荡器上振荡2 min，然后静置20 min以上使甲酯化完全，加入饱和草酸60¨L使甲酯化终止，摇匀静置于一24℃冰箱内20 min。取出，将样液通过无水硫酸钠微柱脱水，用小瓶收集滤液约1．2 mL上机测定。

5.取1ml样品,加2N的甲醇氢氧化钾溶液0.5ml,然后加10ml正庚烷在120度的温度下加热半小时就可以直接进样了.

也可以用比较复杂的方法进行,样品大约20克,无水甲醇50ml左右,加浓硫酸5ml,在不低于95度的水浴中回流六小时以上,然后萃取甲酯.萃取后甲酯用无水乙醇以1:3或1;5比列稀释后进样即可.

6.加入3ml的KOH甲醇溶液，70℃水浴加热回流5min；取出冷却至室温（可用水冷），加入5ml溶液，70℃水浴加热回流5min；取出冷却至室温，加入3ml正己烷，70℃水浴加热回流5min；取出冷却至室温，加入适量饱和食盐水溶液，静止3~5min，取上层油样1ml于试样瓶中，进GC分析

脂肪酸甲酯化方法的选择。在对食物样品中的反式

脂肪酸含量进行分析测定前，需对其甲酯化处理。甲酯化的方

法很多，常用的有氢氧化钾一甲醇法、浓硫酸一甲醇法、三氟化

硼一甲醇法。氢氧化钾-甲醇法是一种在常温下进行的碱处理

方法，其原理是将油脂降解为甘油和脂肪酸，脂肪酸与甲醇结

合生成瞻肪酸甲酯。该方法无需冷凝回流，常温下酯化效果

好，组分完全分离，适用范围广。可用于分析动植物油脂、食品

中油脂、藻类、微生物类脂肪酸，目操作简单。省时省力。

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