LysoTracker Deep Red 深红色溶酶体荧光探针

技术参数

浓度：1mM in DMSO

亚细胞定位：溶酶体

状态：蓝色溶液

颜色：远红外

Ex/Em：647/668 nm

检测仪器：荧光显微镜、荧光成像仪、显微镜

化学性质

pH敏感性：通过质子化作用在酸性区室选择性积累；

光谱特性：相较于LysoTracker Red系列，该变体具有长波长发射，有利于多通道检测；

结构特征：由疏水性荧光团与可质子化基团构成，具有细胞膜通透特性。

注意事项

使用建议：工作液现用现配，使用前37℃平衡；

避免与膜破坏性试剂（如固定剂）同时使用。

不同批次的LysoTracker Deep Red可能存在参数差异，具体实验条件需以产品说明书为准。

保存与运输方法

保存：≤-20ºC避光干燥保存，收到货至少12个月有效。

运输：冰袋运输。

使用方法

使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简单低速离心使溶液降至管底。使用时请将本品按单次用量分装保存，≤-20°C避光干燥保存，尽量避免反复冻融。工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行调整。

1. 工作液的配制

利用生长培养基或缓冲液将1mM储存液稀释至工作浓度，工作液需现配现用。

对于Lysotracker系列溶酶体探针，推荐工作液浓度为50⁻⁷5nM；

【注意】：

1）为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。

2）若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。

2. 染色步骤（贴壁细胞）

1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入培养基，使其爬片生长。

2）待细胞生长到合适密度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针培养基（必须完全覆盖住细胞），在适合特定细胞类型的生长条件下孵育细胞30min-2h（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。

3）利用不含探针的新鲜培养基替换上述染色液，并且用装有合适滤片的荧光显微镜进行观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间，使得染料能聚集在溶酶体上。

3. 染色步骤（悬浮细胞）

1）离心沉淀细胞，吸除上清。

2）利用37℃预热的含探针培养基重悬细胞，在适合特定细胞类型的生长条件下孵育细胞30min-2h（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。

3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养基重悬细胞。

4）用装有合适滤片的荧光显微镜进行观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间，使得染料能聚集在溶酶体上。