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JM109(DE3)Chemically Competent Cell的使用方法(详细步骤)

点击次数:47 发布时间:2025/11/21 15:21:40
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李**
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Ⅰ、【试剂信息】

JM109(DE3)菌株来源于JM109,是在JM109染色体上整合有λ噬菌体(DE3) 区,所以称为JM109(DE3)。能够同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚 合酶,用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达。菌株不可用于蓝白斑的筛选实验。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pUC19质粒DNA 检测,转化效率可达1×108 cfu/µg。使用pET28a-U质粒检测感受态细胞是否 具有表达功能,表达蛋白大小在28 kDa。

Ⅱ、【基本介绍】

中文名称:JM109(DE3) 化学感受态细胞

英文名称:JM109(DE3) Chemically Competent Cell

商家:西安强化生物科技有限公司

保存与运输条件:

保存:-80℃保存

运输:干冰运输。

注意事项:

转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

诱导时,IPTG 浓度可选(0.1-2 mM 均可)。

为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG 浓度需实验者优化。

在操作过程中,请穿戴一次性实验服,保证自身健康

该试剂只用于科研

Ⅲ、【使用方法】

(1)取100 µL冰上融化的感受态细胞,加入目的质粒,轻轻混匀,冰上静置30 min。

(2)42℃水浴热激45~60 s,迅速转移至冰浴中,静置2 min (冰上静置过程中 请勿晃动样品,否则会降低转化效率)。

(3)向离心管中加入700 µL不含抗生素的无菌液体培养基 (SOB或LB),混匀后 37℃,200 rpm复苏60 min。

(4)根据实验需要,吸取不同体积的复苏液均匀涂布到含相应抗生素的SOB或 LB培养基上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

Ⅳ、【相关试剂】

Lywallzyme 真菌溶壁酶

Ar 1193 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

Ar Qual Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

Ar A4 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

C58C1 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

5(6)-FITC DA,荧光酯酶底物,CAS:871487-69-3

TPEN, Heavy Metal Chelator 重金属螯合剂,CAS:16858-02-9

Human α-Thrombin (Factor IIa) 人α-凝血酶,CAS:9002-04-4

本试剂由西安强化生物科技有限公司XAJ精心整理!本试剂只用于科研用途,特此声明!!!


原创作者:西安强化生物科技有限公司

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