「Zeocin 博莱霉素」维持培养稳定转染细胞的方式有哪些？11006-33-0

试剂中英文名称：Zeocin (100mg/ml) 博莱霉素（100 mg/ml）

储存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋运输。

产地：陕西西安

CAS NO：11006-33-0

化学式：C55H83N19O21S2Cu

分子量：1137.41 g/mol

状态：蓝色溶液

纯度：≥95%

一、背景描述：

Zeocin is a ｆormulation of phleomycin D1, a basic, water-soluble, copperchelated glycopeptide isolated from Streptomyces verticillus and shows strong toxicity against bacteria, fungi (including yeast), plants, and mammalian cell lines.

The blue color of the solution is due to the presence of copper and the copper-chelated ｆorm of Zeocin is inactive.

When the antibiotic enters the cell, the copper cation is reduced from Cu2+ to Cu+ and removed by sulfhydryl compounds in the cell.

Upon copper removal, Zeocin is activated, and binds and cleaves DNA, causing cell death.

A Zeocin resistance protein of 13,665 Da, has been isolated and characterized. The protein is the product of the Sh ble gene, binds stoichiometrically to Zeocin and inhibits its DNA strand cleavage activity.

Expression of this protein in eukaryotic and prokaryotic hosts confers resistance to Zeocin.

Zeocin 是叶霉素 D1 的制剂，叶霉素 D1 是一种碱性、 水溶性、 铜螯合糖肽，从对细菌、 真菌 （包括酵母 ）、 植物和哺乳动物细胞具有较强的毒性。

溶液的蓝色是由于铜的存在，并且 Zeocin 的铜螯合形式没有活性。

当抗生素进入细胞时，铜阳离子从 Cu2+ 还原为 Cu+，并被巯基化合物去除。

铜被去除后，Zeocin 被激活，结合并切割 DNA，导致细胞死亡。

Zeocin 耐药性13,665Da 的蛋白质，已被分离和表征。

该蛋白质是 Shble 基因的产物，与 Zeocin 化学计量结合并抑制其 DNA 链切割活动。

这种蛋白质在真核和原核宿主中的表达赋予了对 Zeocin 的抗性。

稳定转染细胞系的维持培养

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞：

1）使用含相同剂量Zeocin的筛选培养基来维持培养；

2）降低Zeocin剂量为原来的一半进行维持培养；

3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来维持培养【根据杀灭曲线来判断】。

二、使用优势

便捷性

100mg/ml即用型无菌溶液，可直接加入培养基，省去配制步骤。

提供冻干粉（需HEPES缓冲液重溶）及预溶母液两种形式，适应不同需求。

广谱高效

单一抗生素适用于原核（细菌）、真核（酵母、哺乳动物细胞）筛选，简化实验流程。

抗性细胞形态与正常细胞无异，便于表型观察。

调控

通过浓度梯度实现选择性杀伤，Sh ble抗性基因提供明确筛选标记。

维持培养时可灵活调整浓度，平衡细胞生长与抗性维持。

以上由西安强化生物小编xxn整理

用于科研相关领域，不能用于人体实验！

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