「CAS：148504-34-1」Calcein，AM，Ultrapure Grade的操作步骤大公开！

标题：Calcein，AM，Ultrapure Grade（Calcein，AM, Ultra Pure Grade 钙黄绿素（绿色）），CAS：148504-34-1

【🍬参数信息】

英文名称：Calcein，AM，Ultrapure Grade

中文名称：钙黄绿素乙酰甲酯

CAS NO：148504-34-1

分⼦式：C46H46N2O23

分⼦量：994.86

Emission (Em)：515

Excitation(Ex)：485

作⽤靶点：Fluorescent Dye

纯度：95%+

厂家：西安强化生物

【简单概述】

Calcein AM is a cell-permeable dye that，upon entering live cells，is cleaved by intracellular esterases，leaving membrane-impermeant calcein，a fluorescent indicator with absorption and emission maxima of 494 and 517 nm，respectively.

It can be used as an indicator of cell viability，cell-cell communication， cytotoxicity，or changes in intracellular calcium，fluoride，iron，or mercury.1，2

As calcein is a substrate for multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) and multidrug resistance protein 3(MDR3， P-glycoprotein 3)， calcein AM is used to study these proteins and their regulation.

钙黄绿素 AM 是一种细胞渗透性染料，进入活细胞后，被细胞内酯酶裂解，留下膜不渗透性钙黄绿素，这是一种荧光指示剂，吸收和发射分别为 494 和 517 nm。

它可用作细胞活力、细胞间通讯、细胞毒性或细胞内钙、氟化物、铁或汞变化的指标。

由于钙黄绿素是多重耐药相关蛋白 1 （MRP1） 和多重耐药蛋白 3 （MDR3，P-糖蛋白 3） 的底物，因此钙黄绿素 AM 用于研究这些蛋白质及其调节。

【操作步骤】

（一）储备溶液配制

钙黄绿素及其衍生物通常以冻干粉形式提供，需用无水DMSO复溶为约1 mg/mL的储存液（如50 µg染料加入50 µL DMSO）。

工作液需用缓冲液（如HBSS）进一步稀释。钙黄绿素-AM水溶液易水解，建议当日使用。

（二）实验操作流程

1.移除培养基，用无血清缓冲液洗涤细胞一次

2.加入Calcein AM工作液，37°C孵育30-60分钟

3.更换为HHBS或含阴离子转运抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液

4.可选择以下任一检测方式检测荧光强度

配备FITC滤光片的荧光显微镜

配置蓝色激光器和5300/30 nm滤光片的流式细胞仪

荧光酶标仪（激发/发射=490/525 nm，截止515 nm）

【相关试剂】

Calbryte 520 AM

西诺沙星-KLH 缀合物

Calcein UltraGreen AM

Cal-520N， potassium salt

Cinoxacin-BSA Conjugate

钙离子荧光探针Cal520N，AM

Calcein AM/PI Double Stain Kit

Calcein Red， AM 钙黄绿素红（红色）

Celltracker CM-DiI 细胞膜橙红色荧光探针

Pluronic® F-127， Cell Culture Tested 细胞培养级

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本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。

原创作者：西安强化生物科技有限公司