pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector 植物表达载体有哪些功能特点？使用方法是什么

标题：pGreenII 0800-Luc Plant Expression Vector 植物表达载体

【🍬参数信息】

载体用途： 植物表达载体

载体大小： 6382bp

原核抗性： 卡那霉素（Kanamycin, Kan）

克隆菌株： DH5α

报告基因： Luc

内参基因： Rluc

启动子： CaMV 35S，T7

复制子： pSa ori，ori

载体拷贝数： 高

5'测序引物： M13F(-47) CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC

3'测序引物： GLP2 CTTTATGTTTTTGGCGTCTTCC

【简单概述】

Deｓcription

We describe novel plasmid vectors for transient gene expression usingAgrobacterium, infiltrated into Nicotiana benthamiana leaves.

We have generated a series of pGreenIIcloning vectors that are ideally suited to transient gene expression, by removing elements of onventional binary vectors necessary for stable transｆormation such as transｆormation selection genes.

我们描述了使用农杆菌浸润到本氏烟叶中的瞬时基因表达的新型质粒载体。

我们通过去除稳定转化所需的本地二元载体元素（例如转化选择基因），生成了一系列非常适合瞬时基因表达的 pGreenII 克隆载体。

功能特点

瞬时表达优化：

移除传统二元载体中稳定转化所需的筛选基因（如抗生素抗性），提升瞬时表达效率。

双荧光素酶报告系统：

Luc（报告基因）与Rluc（内参基因）的组合，可定量启动子活性或转录因子调控作用，减少实验误差。

高兼容性：

适配多种宿主菌株（如大肠杆菌DH5α、农杆菌GV3101/LBA4404等）。

多克隆位点设计支持灵活构建重组质粒。

【使用方法】

Plasmid Protocol

1. Centrifuge at 5,000×g for 5 min.

2. Carefully open the tube and add 20 μl of sterile water to dissolve the DNA.

3. Close the tube and incubate for 10 minutes at room temperature.

4. Briefly vortex the tube and then do a quick spin to concentrate the liquid at the bottom. Speed is less than 5000×g.

5. Store the plasmid at -20 ℃.

6. The concentration of plasmid re-measurement sometimes differs from the nominal value, which may be due to the position of the lyophilized plasmid in the tube, the efficiency of the re-dissolution, the measurement bias, and adsorption on the wall of the tube, therefore, it is recommended to transｆorm and extract the plasmid before using it

质粒方案

1. 在 5,000×g 下离心 5 分钟。

2. 小心地打开试管并加入 20 μl 无菌水以溶解 DNA。

3. 关闭试管并在室温下孵育 10 分钟。

4. 短暂涡旋管子，然后快速旋转以将液体浓缩在底部。速度小于 5000×g。

5.将质粒储存在-20°C。

6.质粒再测浓度有时与标称值不同，这可能是由于冻干质粒在管中的位置、再溶解的效率、测量偏差以及对管壁的吸附，因此，建议在使用前对质粒进行转化和提取。

【相关试剂】

iFluor 555 maleimide

iFluor 680 maleimide

mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯

mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯

iFluor 647 alkyne iFluor 647炔烃

pBl221 Plant Expression Vector

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pGreenll 0800-Luc Plant Expression Vector

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本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。

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