JM109(DE3) Chemically Competent Cell化学感受态细胞有哪些核心优势？转换步骤是什么？

试剂中英文名称：JM109(DE3) Chemically Competent Cell化学感受态细胞

储存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋运输。

产地：陕西西安

转化效率：≥10⁸ cfu/μg DNA（以pUC19检测）

纯度：95%

一、Deｓcription：

Intact Genomics JM109-DE3 chemically competent E. coli cells are suitable for high-efficiency transｆormation in a wide variety of applications such as cloning and sub-cloning.

JM109-DE3 is useful for the high-level expression of genes cloned into vectors for the expression of sequence downstream from the T7 promoter.

描述：

Intact Genomics JM109-DE3 化学感受态大肠杆菌细胞适用于克隆和亚克隆等多种应用中的高效转化。

JM109-DE3 可用于克隆到载体中的基因的高水平表达，以表达 T7 启动子下游的序列。

核心优势：

（1）高效转化能力

转化效率普遍≥10⁸ cfu/μg DNA，部分产品可达5×10⁹ cfu/μg。

适用于质粒DNA的快速克隆、亚克隆及外源基因表达。

（2）遗传背景优化

基因型包含endA1、recA1等突变，显著提升质粒稳定性与纯度。

染色体整合λ噬菌体DE3区，表达T7 RNA聚合酶，支持T7启动子驱动的蛋白表达系统。

（3）操作便捷性

即用型设计，冰上解冻后可直接用于转化。

配套pUC19对照质粒和复苏液，简化实验流程。

二、转换

（1）从-80℃冰箱中取出感受态细胞,并在湿冰上完全解冻(10-15分钟（）

（2） 将1-5μl(1pg-100ng（） DNA等分到冰上的冷冻微量离心管中。

（3） 细胞解冻后,将50μl细胞加入冰上的每个DNA管中,轻敲45次轻轻混合。对于pUC19对照,在加入50μl细胞之前,将1μl(10pg/μl（）DNA添加到冷冻的微量离心管中。敲击充分混合。不要上下移液或涡旋混合,这会伤害细胞并降低转化效

（4）将细胞与DNA在冰上孵育30分钟。

（5）冰孵育30分钟后,在42℃下对细胞进行热休克45秒

（6）将试管转移到冰中2分钟。

（7）向每个试管中加入950μl回收培养基或任何其他选择的培养基。

（8） 将试管在37℃下以210rpm孵育1小时。

（9） 在预热的选择板上从每次转化中涂抹50μl至200μl。我们建议铺板两种不同的体积,以确保至少一个板具有间隔良好的菌落。对于pUC19对照,将50μl接种在含有100μg/ml氮苄青霉素的LB平板上。使用灭菌的撤布器或高压灭菌的大肠杆菌滚镀珠均匀涂

（10）将板在37℃下孵育过夜。

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用于科研相关领域，不能用于人体实验！

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