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PEI 25K 线性化聚乙烯亚胺转染试剂有哪些特点?它都有哪些应用前景?「知识拓展」
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试剂中英文名称:PEI 25K Transfection Reagent 线性化聚乙烯亚胺转染试剂
储存:-20℃干燥避光保存至少1年,低温运输。
产地:西安
CAS:9002-98-6
外观:白色固体
分子式: (CH2CH2NH)n
分子量:25K
溶解性:溶于热水、低pH冷水、甲醇和乙醇
纯度:95%

一、背景描述:
Product Description
PEI 25K is a powerful, trusted, and cost-effective transient transfection reagent. In HEK293 and CHO expression systems, PEI offers consistently high gene expression on a wide scale (96 well plates up to 100 L bioreactors). Each year, more researchers and companies turn to Polysciences PEI to gain a critical edge in their work. Relative to most other options, using PEI to prepare transfection reagents in-house can offer as much as a 40% reduction in total transfection costs.
试剂特点:
1、适用于生产 mABs、rAbs、bsABs和病毒载体(AVV、LV、BEV);
2、在HEK293、CHO 和 Sf9 细胞系中高度有效;
3、适用于从研发到工业化生产的各个阶段;
4、可预测,可大规模生产;
5、两周内即可生成大量目标蛋白或病毒;
6、高转染效率。
应用前景:当前与未来方向
PEI 25K的应用前景广阔,在工业规模生产和生物医药领域,强调其成本效益和可扩展性,但也需注意升级替代品的趋势。
(1)工业规模生产:PEI 25K在HEK293和CHO表达系统中表现突出,支持从微孔板(96孔)到大型生物反应器(100L)的连续高基因表达。
(2)成本效益:内部制备PEI 25K转染试剂可比商业试剂降低总成本40%和,这得益于其原材料廉价和高效性。
(3)生物医药应用:
基因治疗与疫苗开发:和显示,PEI 25K在体内外基因转染中高效,是基因治疗载体设计的核心。未来可结合靶向修饰提升特异性。
重组蛋白生产:适用于瞬时转染,快速获得高滴度蛋白,引用文献支持其在HEK293细胞中的高产应用。
细胞系兼容性:除HEK293和CHO外,还适用于Sf9、HepG2等细胞,与含血清培养基兼容,减少实验干扰。
二、储存液配置(1 mg/mL)
【1】材料
PEI 25000、Milli-Q® 水/注射用水(WFI)或类似的生物级水、12 mol/L盐酸(HCl)、10 mol/LNaOH、一次性0.1~0.2 μm PES 真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。
【2】配置储存液(1 mg/mL)
1)于1 L玻璃烧杯,将1g PEI 25000粉末加入900 mL Milli-Q超纯水或其他相当级别的生物用水中,在磁子搅拌器上搅拌均匀,产生小涡。
2)边搅拌边滴加入盐酸(12 mol/L)调节pH,直至pH<2.0。
3)盖上烧杯顶部并搅拌3小时至完全溶解;整个过程要保持pH<2.0。
【注】:可能会存在一些小纤维状颗粒不能溶解,这是正常现象。
4)边搅拌边滴加入NaOH(10 mol/L)调节pH,直至到6.9 ~7.1。
5)将溶液转入量筒内,并加水定容到1 L。
6)用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌,即得到1 mg/mL的储存液。
7)根据需要分装并储存在-20 °C ,半年稳定。
【注】:储存液再次融化后,可置于4 °C 保存,2周稳定,但绝不可重新冻存。

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