α-Neoendorphin，α-新内啡肽，69671-17-6，体外活性评估的应用方法

试剂名称：α-Neoendorphin ， CAS：69671-17-6

储存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋运输。

产地：西安强化生物

中英文名称：α-Neoendorphin，α-新内啡肽

CAS NO：69671-17-6

分子式：C60H89N15O13

分子量：1228.4

一、背景与概念：

α-新内啡肽是一种在哺乳动物中枢神经系统中发现的内源性阿片肽 。它属于强啡肽（dynorphin）家族，是前强啡肽原（prodynorphin）经蛋白水解裂解后产生的生物活性片段 。

α-新内啡肽的分子结构和性质是其生物功能的基础。

氨基酸序列： α-新内啡肽是一种由10个氨基酸组成的十肽（decapeptide）。

完整的氨基酸序列为：H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Lys-Tyr-Pro-Lys-OH 。

其N端的八个氨基酸片段（α-Neoendorphin (1-8)）。

序列为 Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Lys-Tyr（单字母缩写：YGGFLRKY）。

二、应用方法（体外活性评估）：

【1】放射性配体结合实验（Radioligand Binding Assay）

该方法用于定量评估α-新内啡肽与κ-阿片受体的结合亲和力（affinity）。

实验原理： 通过竞争性结合实验，利用非标记的α-新内啡肽去竞争性地取代与受体结合的已知放射性标记的κ-阿片受体配体，从而测定其抑制常数（Ki）。

标准步骤：

受体制备： 提取表达κ-阿片受体的细胞膜或组织匀浆作为受体来源。

反应体系： 在反应管中加入受体制品、固定浓度的放射性配体、以及一系列梯度稀释的α-新内啡肽。同时设立对照组以确定总结合和非特异性结合。

孵育： 在特定温度（如25°C）和缓冲液（如Tris-HCl缓冲液）中孵育一定时间（如60-90分钟），使结合达到平衡。

分离与检测： 采用快速真空抽滤法，通过玻璃纤维滤膜（如GF/C滤膜）分离与受体结合的放射性配体和游离的配体。

定量分析： 使用液体闪烁计数器测量滤膜上的放射性强度。通过总结合减去非特异性结合得到特异性结合。

数据处理： 将特异性结合百分比对α-新内啡肽的对数浓度作图，通过非线性回归分析拟合S型曲线，计算出其半数抑制浓度（IC50），再利用Cheng-Prusoff方程换算出结合亲和力常数（Ki）。

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用于科研相关领域，不能用于人体实验！

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原创作者：西安强化生物科技有限公司