Ar A4 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞是如何使用的？「干货分享」

标题：Ar A4 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

【🍬参数信息】

英文名称：Ar A4 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

中文名称：Ar A4 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

形态：冷冻悬浮液；

特性：适合大质粒转化、天然卡那霉素抗性、转化效率>10⁴–10⁵ cfu/μg DNA；

规格：10×50μl 、50×50μl

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

【简单概述】

Ar A4 Electrocompetent Cell 是一种发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）菌株Ar A4的电转感受态细胞。

具有以下核心特征：

天然质粒：含有农杆碱型（agropine type）Ri质粒，赋予其广泛的宿主范围（如玉米、烟草、胡萝卜等植物）及卡那霉素抗性（kan^R）。

特殊工艺：通过电转化专用工艺制备，细胞膜通透性增强，适合大质粒（如双元载体）的转化。

适用性：用于电转化（非化学转化），不可用于卡那霉素抗性质粒的转化（因自身具卡那抗性）。

【使用方法】

（一）电转化步骤

混合DNA与细胞

向50–100 μl感受态细胞中加入质粒DNA，轻弹管底混匀（避免气泡），立即放回冰浴。

冰浴静置15–20分钟。

电击操作

将混合液转入预冷的电击杯，避免气泡。

电击参数（参考通用农杆菌设置）：

电容：25 μF，电阻：200–2000 Ω，电压：2.0–2.5 kV。

电击后迅速放回冰浴1分钟。

复苏培养

立即加入500–700 μl无抗生素的LB/YEB/TY液体培养基（28–30℃预温）。

28–30℃振荡培养2–4小时（150–200 rpm）。

（二）涂板与培养

菌体收集

4000–6000 ×g离心1分钟，弃大部分上清，留100 μl液体重悬菌体。

涂布平板

取100 μl菌液涂布于含相应抗生素的TY/LB/YEB平板。

倒置平板，28℃培养2–3天。

【相关试剂】

MPP+ iodide

NAD氧化型辅酶I

DAF-FM DA (5mM in DMSO)

Sodium Nitroprusside(SNP)

S-Nitrosoglutathione(GSNO)

MSU440 Electrocompetent Cell

C58C1 Chemically Competent Cell

AGL1 Chemically Competent Cell

GV3101 Chemically Competent Cell

MSU440 Chemically Competent Cell

LBA4404 Chemically Competent Cell

Acti-stain670phalloidin红色荧光标记鬼笔环肽

ER-TrackerTM Blue-White DPX, for live-cell imaging

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本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。

原创作者：西安强化生物科技有限公司