Myoglobin from Equine Skeletal Muscle的使用方法大公开！100684-32-0

【🍬参数信息】

英文名称：Myoglobin from Equine Skeletal Muscle

中文名称：肌红蛋白（马骨骼肌来源）

CAS NO：100684-32-0

分子量：~17.6 kDa

铁含量：0.25-0.32%

外观：深棕色粉末

溶解性：溶于水（10 mg/ml）

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

【简单概述】

肌红蛋白是一种单链血红素蛋白，来源于马骨骼肌，以冻干粉形式供应。

分子量约为17-17.6 kDa，由153个氨基酸残基组成，不含二硫键或自由巯基（-SH基团）。

结构包含8个右旋α螺旋区域（A-H），通过无序或随机卷曲区域连接，血红素辅基位于E和F螺旋之间，几乎完全被疏水氨基酸包裹。

血红素中心的Fe²⁺含6个配位键：4个结合原卟啉IX的吡咯环氮原子，1个结合F8组氨酸残基（近侧组氨酸），一个可逆结合氧气或其他小分子。

【使用方法】

（一）实验前准备

样品复溶（针对冻干粉）

溶解方法：取适量冻干粉，加入去离子水或缓冲液，浓度为 10 mg/mL。静置10分钟以上，反复颠倒或轻柔搓动助溶，直至完全溶解形成红棕色澄清溶液。

注意事项：若为试剂盒标准品（如冻干管装），需加入 0.5 mL样本稀释液，溶解后恢复至标注浓度。

缓冲液选择

推荐使用 pH 7.0的脱气磷酸盐缓冲液（如0.1 mol/L），以避免氧化干扰。

特殊实验（如光谱研究）需使用MOPS缓冲液（3-(N-吗啉代)丙磺酸缓冲液，pH 7.4）。

（二）特定实验步骤（根据研究目的）

1. 制备脱氧肌红蛋白（DeoxyMb）

步骤：

将溶解后的肌红蛋白溶液置于厌氧环境中，通入 氮气（N2）脱氧10分钟。

加入 固体连二亚硫酸钠（Na2S2O4，5 mg/5 mL溶液） ，继续通氮气10分钟，还原Fe³⁺至Fe²⁺状态。

目的：获得脱氧形式，用于氧结合能力研究。

2. 制备碳氧肌红蛋白（MbCO）

步骤：

在脱氧肌红蛋白溶液中通入 一氧化碳（CO）气体20分钟，使CO与血红素Fe²⁺结合。

应用：用于CO释放分子（CORMs）或配体结合实验。

3. 铁含量与纯度验证

铁含量标准：0.25–0.32%或约0.3%。

纯度检测：通过 SDS-PAGE 验证，纯度需≥95%。

【相关试剂】

DAF-FM DA

3-Estradiol β-峨二醇

免疫印迹及免疫沉淀用裂解液

Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

Total Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

Carboxy-PTIO一氧化氮(NO)清除剂

DAF-FM DA (5mM in DMSO)

Sodium Nitroprusside(SNP)

S-Nitrosoglutathione(GSNO)

1,2-Diaminoanthraquinone

Stigmasterol Glucoside 豆甾醇葡萄糖苷

Trypsin Inhibitor, Soybean 大豆胰酶抑制剂

High-pure Laminin from Mouse EHS sarcoma

以上资料由西安强化生物科技有限公司xxn整理！

本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。

原创作者：西安强化生物科技有限公司