Total Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit有哪些关键特性与注意事项？

【🍬参数信息】

英文名称：Total Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit

中文名称：总一氧化氮检测试剂盒（显色法）

溶解性：溶于部分溶剂。

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

【简单概述】

一氧化氮（Nitric Oxide, NO）是一种活性基，在许多关键生理功能中发挥重要作用。

一氧化氮，一氧化氮合酶（NOS）催化精氨酸的氧化产物，参与宿主防御和发育、调节蛋白活化、以及与功能生物分子之间的直接共价相互作用。

一氧化氮生成后迅速代谢生成亚硝酸盐（Nitrite）和硝酸盐（Nitrate），两种首要的、稳定的和非挥发性的裂解产物，通过对这两种产物的测定能间接反映样本内的一氧化氮水平。

本总一氧化氮检测试剂盒利用两步法测定总一氧化氮水平，先用硝酸盐还原酶将硝酸盐还原为亚硝酸盐，第二步再用经典的Griess reagent，对亚硝酸盐进行定量测定，从而推算出总一氧化氮含量。

由于本试剂盒使用的是NADPH依赖的硝酸盐还原酶，高浓度的NADPH会干扰后续检测，因此，试剂盒使用乳酸脱氢酶（LDH）来清除NADPH，确保检测结果的准确性。

本试剂盒以亚硝酸钠为标准品，通过优化的检测体系，检测下限达2μM，且在2~80μM范围内具有良好的线性关系。

本试剂盒不仅能检测细胞、组织或培养液中的一氧化氮含量，还能检测血清、血浆或尿液中的一氧化氮含量。

关键特性与注意事项

检测范围与灵敏度：

检测下限通常为1.35–2 μM，线性范围覆盖2–100 μM。

提到较高灵敏度的试剂盒。

适用样本类型：

细胞培养上清液、血清、血浆、尿液、组织匀浆液等。

注意：高蛋白样本（如血清）需预先煮沸离心去除沉淀；尿液需稀释10–50倍；避免使用含肝素抗凝的血浆或含高浓度硝酸盐的培养液（如RPMI 1640）。

干扰因素：

还原剂（如DTT、巯基乙醇）会抑制硝酸盐还原酶活性，需避免使用。

操作需全程避光，防止偶氮化合物分解。

与普通NO试剂盒的区别：

普通NO试剂盒仅检测亚硝酸盐（NO2⁻），而总NO试剂盒通过还原酶将硝酸盐（NO3⁻）转化为NO2⁻，,反映总NO水平。

若仅需粗略测定NO相对量，可选普通显色法试剂盒；需精确测定细胞内NO时，建议使用荧光探针（如DAF-FM DA）。

【相关试剂】

DAF-FM DA

3-Estradiol β-峨二醇

Echinocandin B 棘白菌素B

2'-脱氧腺苷-5’-二磷酸二钠盐

EPI400 Electrocompetent cell

DH10B Electrocompetent cell

GT115 Electrocompetent Cell

α-Factor Mating Pheromone, yeast

YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基

YPDA Medium YPDA液体培养基

Minimal SD Agar Base SD琼脂基础培养基

Minimal SD Base SD基础培养基

Stigmasterol Glucoside 豆甾醇葡萄糖苷

Trypsin Inhibitor, Soybean 大豆胰酶抑制剂

High-pure Laminin from Mouse EHS sarcoma

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本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。

原创作者：西安强化生物科技有限公司