pGBKT7 Vector 是一种酵母双杂交载体，它具有哪些特性？

【🍬参数信息】

英文名称：pGBKT7 Vector (pGBKT7 DNA-BD Vector) 酵母双杂交载体

中文名称：pGBKT7 Vector (pGBKT7 DNA-BD Vector) 酵母双杂交载体

载体大小：7303 bp（双链DNA环状结构）。

启动子：包含ADH1启动子（用于驱动表达）、T7启动子（用于体外转录和翻译）。

复制子：包含2μ ori（酵母复制子）和pUC ori（大肠杆菌复制子）。

抗性基因：Kan（卡那霉素抗性）和TRP1（色氨酸合成基因，用于筛选）。

克隆位点：多克隆位点（MCS），支持限制性内切酶切割和克隆。

表位标签：c-Myc表位标签，用于蛋白检测。

用途：用于酵母双杂交系统，表达GAL4 DNA结合域（DNA-BD）与目标蛋白的融合蛋白。

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

【简单概述】

pGBKT7 是一种酵母双杂交载体，可用于表达 GAL4 DNA 结合结构域（DNA-BD）与 bait 蛋白的融合蛋白。

其核心功能是通过酵母双杂交系统检测蛋白质间的相互作用。

其结构和特性包括：

启动子与表达系统：

ADH1 启动子驱动融合蛋白的高表达。

T7 启动子促进体外转录和翻译。

融合蛋白构建：

载体表达 GAL4 DNA 结合结构域与 bait 蛋白的融合蛋白，通过多克隆位点（MCS）插入目标基因。

筛选与标记：

卡那霉素抗性（Kanr） 和 TRP1 营养标记 用于筛选宿主细胞。

其他元件：

c-Myc 表位标签 用于蛋白检测。

2μ ori 和 pUC ori 用于复制和维持质粒稳定性。

【优势】

酵母双杂交系统主要应用于快速验证已知蛋白之间的相互作用或寻找新的相互作用蛋白质，尤其在寻找蛋白质互作区域时相当有优势。

其优点有：

(1)采用高拷贝和强启动子的表达载体使目的蛋白过量表达，方便复合物形成;

(2)筛选过程在真核酵母活细胞内进行，一定程度上反映了体内的真实情况;

(3)检测的结果是基因表达产物的级联效应，通过mRNA产生多种稳定的酶使信号放大，因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用，而细胞内的免疫共沉淀依赖于两个互作蛋白质的解离程度，因为在免疫沉淀的过程中通过洗涤的过程降低了互作信号;

【相关试剂】

iFluor 647 TCO

ATTO 488 acid ATTO 488酸

Lucifer Yellow CH (Lithium salt)

Tetranactin 四活菌素 33956-61-5

三活菌素 Trinactin 7561-71-9

Monactin 单活菌素 7182-54-9

BMPO (Spin trapping reagent)

Dewaxing/Clearing Reagent for Histology

Permount Mounting Medium Permount

N-glycolylneuraminic acid (Neu5Gc) N-羟乙酰神经氨酸

N-Acetylneuraminic Acid (NANA, Neu5Ac) N-乙酰神经氨酸

3'-Sialyllactose Sodium Salt (NANA-Lactose, 3'-SL) 3'-唾液乳糖钠盐

AFDye 488 NHS ester (Equivalent toAlexa Fluor 488 NHS ester）

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本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。

原创作者：西安强化生物科技有限公司