EMSA PAGE凝胶配制试剂盒的具体原理解析

【作用机制】

EMSA PAGE凝胶配制试剂盒的作用机制基于蛋白质-核酸复合物在电泳中的迁移率差异，具体原理如下：

实验原理

在非变性PAGE电泳中，蛋白质与DNA/RNA形成的复合物因分子量增加，迁移速度慢于游离的核酸片段。这种迁移率的差异导致复合物与游离核酸在凝胶上的位置分离，从而可通过染色或放射性标记检测。

试剂盒的关键功能

凝胶制备：通过混合丙烯酰胺/双丙烯酰胺、缓冲液和引发剂（APS/TEMED），在模具中形成具有特定浓度的凝胶。凝胶浓度（如4%-6%）需根据目标蛋白和核酸的大小调整。

电泳条件优化：试剂盒配套的缓冲液（如TBE）和预电泳步骤（如100 V预电泳10分钟）可确保加样孔的清洁和电泳的均匀性。

安全性与便捷性：部分试剂盒采用改良型促凝剂替代TEMED，减少挥发性和毒性风险，同时通过颜色标记（如红色上层胶）辅助操作。

【试剂名称】

英文名称：EMSA PAGE Gel Preparation Kit

中文名称：EMSA PAGE凝胶配制试剂盒

【物理性质】

主要试剂：

丙烯酰胺（Acr/Bis） ：通常以30%或40%浓度提供（如39:1或29:1比例），用于制备凝胶主体。

过硫酸铵（APS） ：作为凝胶聚合催化剂，需溶解于蒸馏水中配制成10%溶液，分装后-20℃保存，避免失效。

四甲基乙二胺（TEMED） ：加速凝胶聚合，通常以溶液形式提供，需避光保存。

甘油：50%或80%甘油用于调节凝胶密度和稳定性。

缓冲液：如5×TBE缓冲液（Tris-HCl、EDTA、硼酸）用于配制凝胶溶液。

凝胶浓度与厚度：

分离胶浓度：通常为4%-6%，具体浓度根据目标蛋白分子量调整。

凝胶厚度：常规厚度为0.75mm、1mm或1.5mm，不同厚度对应可制备的凝胶数量。

【运输与保存】

纯度：≥95%

运输：低温运输。

保存：-20℃，干燥、避光。

试剂厂家：Xianqianghua

【注意事项】

1） PAGE胶凝固剂配制成10%溶液后，应分装成小份-20℃保存，通常6个月有效。同时尽量减少室温存放时间，使用完立即放回冰箱，防止失效

2） 配制PAGE胶的过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。

3） 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水速度不能过快。

4） 30% Acr-Bis具轻微神经毒性，请小心操作，并且注意有效防护以避免直接接触人体。

5） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

【相关的试剂】

Nocodazole 诺考达唑

Cytochalasin B 细胞松弛素B

Cytochalasin D 细胞松弛素D

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

TRITC Phalloidin TRITC标记鬼笔环肽

30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,29:1

30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,37.5:1

40%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,29:1

40%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,37.5:1

4x Tris-HCI (1.5 M Tris-HCI), pH8.8

10×TBE Buffer 10×TBE缓冲液

SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

EMSA PAGE Gel Preparation Kit EMSA PAGE凝胶配制试剂盒

TEMED 四甲基二乙胺

Ammonium Persulfate (APS)过硫酸铵

注意：本试剂用于科研领域，其他用途概不适用！

编辑：以上内容由西安强化生物科技xxn整理！

原创作者：西安强化生物科技有限公司