Picro Sirius Red Stain天狼星红染色液的操作方法和避坑指南！

【操作步骤】

一、 需要自行准备的材料

1） 10%福尔马林固定液。

2） 中性树胶封片剂

3） 普通光学显微镜或偏振光显微镜

二、染色步骤

组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。

切片厚度6~7μm为宜，以按常规方法脱蜡至水。

天狼星红染色液染色1h（亦可滴染）。

0.5%稀乙酸快速冲洗2次。

无水乙醇快速冲洗切片。

常规脱水透明、中性树胶封固。

普通光学显微镜或偏振光显微镜下观察。

【常见问题与解决方案】

（一）染色结果不清晰或颜色异常

问题：染色后胶原纤维未呈现预期的红色或双折射现象不明显。

原因：

切片厚度不符合要求（如过厚或过薄）。

染色时间不足或过长，导致染色不充分或过度。

染色液未充分混合或存在沉淀。

解决方案：

严格控制切片厚度为6-7μm（偏振光显微镜观察）。

根据组织类型调整染色时间（通常1小时），胶原纤维少的组织可延长至60分钟。

使用前过滤染色液以去除沉淀，确保溶液均匀。

（二）偏振光显微镜下无法区分I型和III型胶原

问题：双折射现象不明显或颜色识别错误。

原因：

显微镜未正确安装偏振片或光源设置不当。

染色后未及时观察，导致双折射现象减弱。

解决方案：

使用配备偏振光功能的显微镜。

染色后立即进行观察，避免长时间暴露。

（三）染色液保存或运输不当导致失效

问题：染色液变色、沉淀或失效。

原因：

未避光保存或温度过高（如超过4℃）。

运输时未控制温度（如高温或低温冻存）。

解决方案：

保存时避光并置于4℃，有效期通常为1年。

运输时选择室温运输，避免冷冻。

【试剂名称】

英文名称：Picro Sirius Red Stain

中文名称：天狼星红染色液

【物理性质】

稳定性：染色液可能因时间久置出现轻微沉淀，建议使用前过滤。

显色特性：

在普通光学显微镜下，胶原纤维被染成红色或橘红色，背景组织呈黄色至橘黄色，细胞核通常与苏木素复染后呈蓝色。

在偏振光显微镜下，通过增强胶原纤维的天然双折射性，可区分不同类型的胶原纤维：

I型胶原纤维：呈橙黄色或亮红色，排列紧密，具有强双折射性 。

III型胶原纤维：呈绿色，细纤维状，双折射性较弱。

其他类型胶原纤维（如II型和IV型）的显色效果因组织类型而异，但通常表现为弱双折射或不同颜色

【运输与保存】

纯度：≥95%

运输：低温运输。

保存：-20℃，干燥、避光。

【注意事项】

个人防护：佩戴合适的防护眼镜、手套、防护服等。

实验条件：温度、湿度要求，远离火源、氧化剂等。

【相关的试剂】

CDCFDA,SE活细胞示踪探针

BCECF,AMpH荧光探针 117464-70-7

Prostaglandin E3 (PGE3) 前列腺素E3

Prostaglandin A2 (PGA2) 前列腺素A2

Celltracker CM-Dil活细胞示踪剂CM-Dil （红色）

Acti-stain555phalloidin橙红色荧光标记鬼笔环肽

BAPTA,Tetrasodium Salt钙螯合剂，126824-24-6

73630-08-7，BAPTA,Tetrapotassium Salt钙螯合剂

EGTA AM,CalciumChelator钙螯合剂，99590-86-0

Cyanine 3 monoacid [equivalent to Cy3 acid] Cy3,酸

Cyanine 5 monoacid [equivalent to Cy5 acid] Cy5,酸

Cyanine 7 monoacid [equivalent to Cy7 acid] Cy7,酸

注意：本试剂用于科研领域，其他用途概不适用！

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