Fluoromount-GTM 抗荧光淬灭封片剂（水溶性）的操作步骤【实验干货】

【操作步骤】

1. 基本操作流程

样本准备

细胞涂片：通过离心或刮片法制备细胞涂片，固定后进行免疫染色（如使用DAPI或特异性抗体）。

组织切片：脱水、透明化（如使用二甲苯），进行免疫染色后吸尽染液。

滴加封片剂

普通型：取1-2滴Fluoromount-GTM（约50-100μl）覆盖于样本表面，避免产生气泡。

含DAPI型：直接使用含DAPI的版本，无需额外复染。

盖玻片覆盖

将盖玻片轻轻置于样本上，用纱布或滤纸轻压边缘，排除多余封片剂。

晾干与保存

室温下避光晾干5-10分钟，形成透明涂层。

若需长期保存，可用指甲油密封盖玻片边缘，确保干燥。

显微镜观察

封片完成后，可在普通荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察。

【常见问题与解决方案】

（1）荧光信号减弱或淬灭

原因：荧光染料在光照、氧化或化学物质（如卤素离子、重金属）作用下发生光漂白或结构破坏。

解决方案：

使用含抗荧光淬灭剂（如）的Fluoromount-GTM，其配方可有效延缓荧光信号衰减。

封片后避光保存，避免长时间暴露于强光下。

若需复染细胞核，选择含DAPI的版本（如DAPI-Fluoromount-GTM），DAPI本身具有荧光特性，可辅助观察。

（2）操作不当导致气泡或不均匀覆盖

原因：滴加过量封片剂或盖玻片未充分贴合，导致气泡形成，影响光学观察。

解决方案：

滴加少量封片剂（约1滴），用盖玻片轻压边缘，排除多余液体。

确保样本与盖玻片紧密接触，避免气泡残留。

（3）保存时间缩短或样品变质

原因：未按要求避光保存或温度波动导致样品降解。

解决方案：

室温避光保存（部分产品需-20℃避光，需根据具体规格确认）。

封片后密封边缘（如用指甲油）以延长保存时间。

【试剂名称】

英文名称：Fluoromount-GTM 抗荧光淬灭封片剂（水溶性）

中文名称：抗荧光淬灭封片剂（水溶性）

【物理性质】

折射率：约为 1.45–1.46。

光学透明性：封片后形成透明涂层，便于后续荧光信号的清晰观察。

水溶性：Fluoromount-GTM 是一种无色透明的水溶性液体。

适用于免疫荧光、免疫细胞化学、免疫组化等实验中一步染色为水溶液体系的样本封片。

成分：主要成分为甘油、聚乙烯醇、磷酸盐缓冲液、0.1% 叠氮钠（防腐剂）等，部分产品还添加了荧光保护剂。

【运输与保存】

纯度：≥95%

运输：低温运输。

保存：-20℃，干燥、避光。

【注意事项】

个人防护：佩戴合适的防护眼镜、手套、防护服等。

实验条件：温度、湿度要求，远离火源、氧化剂等。

【相关的试剂】

CDCFDA,SE

BCECF,AMpH荧光探针

Prostaglandin E3

Prostaglandin A2

Celltracker CM-Dil活细胞示踪剂

Rhodamine-WGA 罗丹明标记麦胚凝集素

FITC-PNA (FITC labeled Peanut Agglutinin)

Rhodamine-PNA (Rhodamine labeled Peanut Agglutinin)

FITC-LEL (FITC labeled Lycopersicon Esculentum(Tomato)Lectin)

DyLight 488-LEL (DyLight 488 Labeled Tomato Lectin) DyLight

DyLight 594-LEL (DyLight 594 Labeled Tomato Lectin)DyLight

注意：本试剂用于科研领域，其他用途概不适用！

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