TOTO 1绿色荧光染料，染色步骤优化

【参数信息】

英文名称：TOTO 1 Green Fluorescent Dye

中文名称：TOTO 1绿色荧光染料

CAS NO：143413-84-7

分子式：C49H58I4N6S2

分子量：1302.78

外观：溶液

Ex/Em：~514/531nm

消光系数：117000 cm -1 M -1

光量子产率：0.34

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

【简单概述】

TOTO 1绿色荧光染料是一种细胞非通透性、高亲和力的核酸荧光染料，属于噻唑橙同源二聚体（Thiazole Orange Homodimer, TOhD）。

其主要功能是选择性标记死细胞或固定细胞的核酸（DNA/RNA），产生明亮的绿色荧光信号。

化学本质：对称性氰基二聚体结构（bis-intercalator），，含四个正电荷，增强与核酸的亲和力 。

荧光机制

选择性结合：游离状态下无荧光，嵌入核酸（DNA/RNA）后荧光强度增强100-1000倍。

电荷效应：4个正电荷大幅提升与带负电核酸的亲和力，灵敏度远超单菁染料（如碘化乙锭）。

【染色步骤优化】

工作液配制：

储存液（5 mM in DMSO）需室温解冻，低速离心后，用HHBS缓冲液或生理缓冲液稀释至1–10 μM工作浓度。

实验必做浓度梯度测试：避免高浓度（>10 μM）导致非特异性染色（如细胞质背景）。

染色流程：

1. 吸除细胞培养基；

2. 加入TOTO 1工作液，覆盖细胞（悬浮/贴壁均适用）；

3. 避光孵育15–60分钟（时间依细胞类型优化）；

4. 吸除染液，用缓冲液洗涤2次。

关键提示：残留去污剂可能导致假阳性染色，需清洗玻片或培养器皿。

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本试剂仅适用于科研实验，敬请知悉。

原创作者：西安强化生物科技有限公司