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Alexa Fluor 488-ConA:ConA的功能与结构
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【描述】
Alexa Fluor 488-ConA结合了AF488的荧光性能与ConA的糖结合特异性,用来研究糖生物学、免疫学及细胞生物学。
ConA的功能与结构
ConA是从刀豆中提取的凝集素,分子量为102 kDa,由四个亚基组成,每个亚基含Ca²⁺和Mn²⁺结合位点,需金属离子存在才能发挥活性。
其主要功能包括:
糖结合特异性:选择性结合α-甘露糖和α-葡萄糖残基,存在于糖蛋白、糖脂中。
生物学活性:
作为T细胞有丝分裂原,激活免疫细胞并诱导细胞因子释放。
通过线粒体途径诱导细胞凋亡和自噬。
【Alexa Fluor 488-ConA的合成与制备】
偶联方法:
NHS酯法:利用AF488的NHS活性基团与ConA的氨基(如赖氨酸残基)反应,形成稳定共价键。
EDC/NHS交联法:适用于羧基与氨基的偶联,常用于大分子标记。
纯化与保存:
通过亲和层析去除未结合的荧光素,确保标记纯度≥95%。
储存液建议浓度为2 mg/mL,分装后-20℃避光保存,避免反复冻融。
质量控制:
需验证结合效率(如SDS-PAGE)及荧光性能(如光谱扫描)。
【技术参数】
英文名称:Alexa Fluor 488-ConA
中文名称:Alexa Fluor 488标记的刀豆凝集素A
糖类特异性:α-甘露糖;α-葡萄糖
外观:固体
Ex/Em:495/519nm
荧光颜色:绿色
纯度:≥95%
储存条件:-20℃避光干燥
运输方式:冰袋运输
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