（CAS：108964-32-5）Fura-2，AM，Cell Permeant 钙离子荧光探针实验操作与注意事项

一、简要介绍

Fura-2 AM（乙酰甲酯化Fura-2）是一种具有较高亲和力、细胞渗透性的钙离子荧光探针，属于紫外激发比率型染料。该探针可溶于DMSO至10 mM浓度，在细胞质中被酯酶水解为活性形式Fura-2，从而滞留于胞内。

细胞通透性机制

Fura-2 AM通过乙酰甲酯（AM）基团修饰羧酸基团，降低极性并增强疏水性，使其能够被动扩散穿过细胞膜。进入细胞后，胞内酯酶水解AM基团，释放带负电荷的Fura-2，后者因无法穿透细胞膜而积累于胞质。此过程避免了微注射等侵入性加载方法，适用于多种细胞类型。

二、试剂结构

三、物理性质

【英文名称】：Fura-2，AM，Cell Permeant

【中文名称】：荧光钙探针 Fura 2-AM

【CAS NO】：108964-32-5

【分子式】：C44H47N3O24

【分子量】：1001.86

【外观】：黄色粉末

【Ex/Em】：363/512 nm（Ca2 +-free），335/505 nm（Ca2+-saturated）

【密度】：1.400±0.06 g/cm3

【溶解性】：溶于DMSO（1~5mM）

【纯度】：≥95%

【储存条件】：-20℃避光干燥

【生产厂商】：西安强化生物科技

四、实验操作与注意事项

实验步骤

储存液配制：将Fura-2 AM溶于无水DMSO（1-5 mM），分装避光保存于-20℃。

工作液制备：用HBSS或生理缓冲液稀释至0.5-5 μM，加入0.02% Pluronic F-127防止聚集。

细胞加载：与细胞共孵育15-60分钟（37℃），随后洗涤并再孵育20-30分钟以确保完全去酯化。

检测参数：激发波长340/380 nm，发射波长505-510 nm；可使用双波长比率成像。

关键注意事项

避光操作：光照加速荧光淬灭，需全程避光。

温度控制：低温可能导致DMSO凝固，需在20-25℃融化后使用。

细胞D性：较高浓度的Fura-2 AM或过度孵育可能因甲醛/乙酸副产物产生D性，需优化加载条件。

校准要求：实验前需测定Rmin（Ca2+耗尽）和Rmax（Ca2+饱和）。

五、更多试剂

Nile Red尼罗红

BODIPY 505/515

BODIPY 493/503

Fluo-5N AM，Cell Permeant

Mag-Fura-2 AM，Cell Permeant

Cyanine 5.5 bissuccinimidyl ester

Cyanine 5 monosuccinimidyl ester

Ca1-630 Potassium Salt钙离子荧光探针

C11 BODIPY 581/591脂质过氧化荧光探针

Quin-2 Tetrapotassium Salt钙离子荧光探针

ZnAF-2 DA，Cell Permeant锌离子荧光探针

ZnAF-2F DA，Cell Permeant锌离子荧光探针

5-TRITC 四甲基罗丹明-5-异硫氰酸 CAS 80724-19-2

6-TRITC 四甲基罗丹明-6-异硫氰酸 CAS 80724-20-5

原包装应尽量选择避光，阴暗，干燥的地方进行存放，同时此试剂仅用于科研实验。

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原创作者：西安强化生物科技有限公司