脊髓灰质炎病毒IgG、IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

脊髓灰质炎病毒IgG、IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化进口PV抗原（1-3型）预包被板ELISA原理，检测人血清/血浆中存在的脊髓灰质炎病毒I-III型IgM抗体。并配以酶标记抗人IgM单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔OD值，OD值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性大地提高是本试剂含有的独特优点。

[用途]

本试剂盒用于检测人血清/血浆中存在的脊髓灰质炎病毒I-III型IgM抗体。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板 1块（48T/96T）

2、阴、阳性对照 各1瓶（直接使用）

3、标本稀释液

1瓶（10ml/48T；20ml/96T）

4、酶结合物

1瓶（5/12ml，直接使用）

5、30X浓缩洗液

1瓶（10/20ml，加蒸馏水1：30稀释使用）

6、显示剂A、B液 各1瓶（3/5ml）

7、终止液（2M H₂SO₄） 1瓶（3/5ml）

8、说明书 1份

[操作步骤]

1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。

2、样本稀释：用标本稀释液以1∶101（5ul-500ul）稀释标本。吸取已稀释待检标本100ul于反应孔中，设阴、阳性对照（各100ul/孔）及空白对照（不加任何液体）各一孔，轻拍混匀，37℃温育30分钟。

3、将浓缩洗涤液用蒸馏水做30倍稀释。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。

4、加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟，同上法洗涤3次并拍干。

5、显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。

[结果判定]

1、目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。

2、 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。

①P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。

②P/N≥2.1为阳性；

③1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴 性。

④阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计,大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1、微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。

2、滴加试剂应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3、洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4、试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

5、避免用溶血、混浊或脂血标本。

6、好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。