白喉杆菌（diphtheriae）抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

白喉杆菌（diphtheriae）抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

使 用 说 明（96T/48T）

[原理]

白喉杆菌（diphtheriae）IGM 抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

本试剂盒采用亲和素-生物素化白喉杆菌纯化抗原预包被板ELISA原理，检测人血清/血浆中存在的白喉杆菌IgM 抗体，并配以酶标记抗人IgM单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性大地提高是本试剂含有的独特优点。

[用途]

本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的白喉杆菌IgM抗体，用于百白破菌苗接种后效果的监测、疾病诊断和流行病学调研。

适应范围：

疫苗接种后效能监测和疾病诊断。

流行病学调研和疾病感染的诊断。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板 1块（8X12/4X12）

2、阴性对照 1瓶 （直接使用）

3、阳性对照 1瓶（直接使用）

4、标本稀释液

1瓶（20/10 ml，直接使用）

5、酶结合物 1瓶（12/5ml，直接使用）

6、30X浓缩洗液

1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）7、显示剂A、B液 各1瓶

8、终止液（2M H₂SO₄） 1瓶

9、说明书 1份

[操作步骤]

1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。

2. 样本稀释：用标本稀释液以1：101（5ul—500ul）稀释标本。于反应板中加已稀释待检标本及阴阳性对照（100ul）各一孔，设空白对照一孔（加100ul标本稀释液）轻拍混匀。

3. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。

4. 加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。

5. 显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。

[结果判断]

1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。

2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。

① P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。

② P/N≥2.1为阳性；

③ 1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴 性。

④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余 者封存置2-8℃。

2. 滴加试剂应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4. 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。

6. 好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。