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犬粪包虫抗原检测试剂盒说明书
点击次数：56 发布时间：2024/5/28 14:09:34
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钟**
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犬粪包虫抗原检测试剂盒说明书
【产品名称】
通用名称：犬粪包虫抗原检测试剂盒
编制：深圳市恒昊生物科技有限公司
练系：I73－－I806==9I87
编制：深圳市恒昊生物科技有限公司
练系：I73－－I806==9I87
英文名称：Hydatid（Hyd）coproantigens Test Kit for Canine
【包装规格】96 份/盒、192 份/盒
【预期用途】本试剂盒采用 ELISA 方法定性检测犬粪中包虫抗原。
【检测原理】如果待检样品中含有包虫抗原，就会与包被板上的包虫抗体及第二步加入的酶标
结合物特异性结合，间接结合在包被板上的酶标结合物与底物反应的显色状况即可反映出
样品中是否含有包虫抗原。
【储存条件及有效期】 2~8℃避光保存，防止冷冻，有效期为 12 个月。
【适用仪器】
含 450nm 和 630nm 波长的酶标仪；37℃恒温设备；可调单道/多道微量移液器。
【样品要求】
1、本试剂适用于检测犬粪样品；
2、应采集新鲜的犬粪样品进行测试。若不能及时检测，应将粪样低温冻存，防止腐败或
反复冻融。如犬粪难以溶解，应适当捣碎处理。
【检验方法】
1. 洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将洗涤液 10×（2 号液）按 1:10 稀释（例如，取 100mL
洗涤液 10×，加 900mL 蒸馏水或去离子水混合），充分混匀即为工作浓度洗涤液。
2. 样品稀释液配制：用蒸馏水或去离子水将样品稀释液 2×（5 号液）按 1:1 稀释（如取
100mL 浓缩样品稀释液加 100mL 蒸馏水或去离子水），充分混匀即为工作浓度样品稀
释液。
3. 样品处理：犬粪样品需要预先低温（-70℃以下）冷冻 7 天以上，以灭活虫卵。称取 1
克犬粪,加入 1mL 工作浓度样品稀释液，充分搅拌混匀，静置 10 分钟，再 3000rpm 离
心 10 分钟，取上清液待检。
4. 加样反应：样品孔，每孔仅加入 100μL 待检样品；阴性对照 2 孔，每孔仅加入 100μL
阴性对照品；阳性对照 2 孔，每孔仅加入 100μL 阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光
反应 30 分钟。
5. 洗板：甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗板 6 次，每次均需静置 1 分钟；
后一次甩净，拍干。
6. 加酶反应：每孔加酶结合物（1 号液）100μL，盖好封板膜，37℃避光反应 30 分钟。甩
去孔内液体，如上洗板，拍干。
7. 显色反应：按所需用量，临用取等体积底物（3 号液）和显色剂（4 号液）充分混匀
后每孔加 100μL，盖好封板膜，37℃避光反应 10 分钟。
8. 终止反应： 加终止液（6 号液）50μL，用酶标仪双波长（450nm 作为主波长，630nm
作为参比波长）读取 OD 值。
【参考值】
1.
Cut-off 值（COV）=阴性对照平均 OD 值×2.1（阴性对照孔 OD 值＜0.15 时按 0.15 计）。
2.
有效性判定：
阴性对照孔 OD 值≤0.30（若大于 0.30 则实验无效）；
阳性对照孔 OD 值≥0.50（若小于 0.50 则实验无效）。
【检验结果的解释】
样品 OD 值≥COV，判为包虫抗原阳性；
样品 OD 值＜COV，判为包虫抗原阴性。
【检验方法的局限性】 本试剂盒仅供筛查，不作为确诊依据。
【注意事项】
1. 试剂盒各组份从冷藏环境中取出时，必须平衡至室温后，方可开封启用。未使用完的
试剂组份应及时放回 2~8℃密封保存。
2. 加试剂应将试剂轻摇、混匀。
3. 孵育时必须用封板膜密封板孔，封板膜不可以重复使用。
4. 不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧，各瓶之间瓶
盖不可混用。
5. 用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性，须小心使用。
原创作者：深圳市恒昊生物科技有限公司
