端粒长度检测

端粒长度检测在衰老疾病和tumour中也具有重要诊断价值。其主要机制在于端粒是细胞衰老的分子钟，由于DNA 聚合酶不能完整的复制染色体的末端（DNA 复制问题），细胞每分裂一次，端粒就变短一点。几乎所有的正常人体细胞会随着细胞分裂出现端粒逐渐缩短，并终引发细胞复制性衰老。此时，少数细胞获得了端粒酶活性，并且继续分裂转化为tumour细胞。多项研究表明，那些细胞中有较短端粒的人更容易患像癌症、心脏病和老年痴呆症(阿尔兹海默症)之类的疾病，甚至会较早死亡。小鼠实验则表明，延长端粒能够增加寿命的长度。

就目而言，常用的端粒长度检测方法包括：端粒末端限制性片段分析（Terminalrestriction fragment，TRF），定量PCR（qPCR），荧光原位杂交（Fluorescencein situ hybridization，FISH），单链端粒长度分析（Singletelomere length analysis，STELA）和基于全基因组测序（WGS）的端粒长度分析。

基础研究通常检测培养的细胞或组织端粒长度，临床研究和流行病学研究通常检测外周血淋巴细胞的端粒长度。如果有大规模的样本需要进行高通量检测，例如流行病研究及临床大样本的端粒长度筛查，qPCR 是比较好的选择，qPCR 用于流行病学研究有简便、经济、高通量，DNA 用量少等优势。上规模的（10万人）端粒长度检测项目(Lapham et al., 2015)，采用的即是qPCR方法。

检测原理

该项服务基于自主研发的双色荧光定量法端粒长度检测试剂盒，应用双色荧光QPCR，适用于血液、口腔拭子或细胞DNA。采用新型多拷贝基因作为内参基因，开创了扩增效率高、稳定性强、误差更小的双色荧光qPCR法，并初步建立了面向中国人群、包含1500例阶梯式年龄组血样DNA端粒长度数据库。

服务流程

1.样本DNA提取；

2.DNA质控；

3.qPCR扩增。

提供结果

根据定量PCR结果，计算出的T/S比值。

样本要求

1、若样品为血液基因组DNA，要求：DNA浓度≥20ng/ul，体积>20ul。纯度OD260/OD280 在1.8～2.0之间。

2、若分型样品为血样，样本要求：血液样品，体积大于500ul，只能采用EDTA抗凝剂抗凝，送样过程中请注意保持低温，防止DNA降解。提取DNA将收取DNA提取费。

3、若为唾液样本，需保存于用管中。

原创作者：上海松茸生物科技有限公司