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EPI300 感受态

EPI300 感受态

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价格:¥电议

更新日期:2026/8/7 18:08:12

生 产 地:中国大陆

产品型号:CC96163-01

简单介绍:EPI300 细胞含有一个突变的 trfA 基因,该基因表达出的蛋白产物可以促进含有 oriV 复制子的质粒的高拷
贝扩繁,诱导剂Ⅰ可以诱导 trfA 基因的表达。

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详细内容

产品简介
EPI300 细胞含有一个突变的 trfA 基因,该基因表达出的蛋白产物可以促进含有 oriV 复制子的质粒的高拷
贝扩繁,诱导剂Ⅰ可以诱导 trfA 基因的表达。当含有 oriV 复制子质粒的 EPI300 细胞在 LB/2YT 或 SOB 培
养基中生长时,trfA 基因的表达被抑制,oriV 复制子质粒的拷贝数维持在很低的水平;当在培养基中加入
CopyMore 300 诱导剂时,oriV 复制子质粒的拷贝数可维持在很高的水平,提高了质粒产量。因此,
EPI300 菌株可以降低 oriV 复制子质粒的拷贝数,特别适合于各种不稳定 DNA 或毒性基因的克隆。 [mrr
hsdRMS-mcrBC]基因型使 EPI300 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA(例如:哺乳动物
基因组 DNA)。recA1 和 endA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。lacZΔM15 标
记的存在使 EPI300 可用于蓝白斑筛选,rpsL 赋予其链霉素抗性。经 pUC18 质粒转化检测,EPI300 感受态
细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
EPI300
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F – mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697 galU galK λ– rpsL nupG
trfA dhfr
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
3EPI300 化学感受态
#CC96164. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
BW25113 CC96162-01 10 ×100ul 500
CC96162-02 100×100ul 4,250
DB3.1 CC96182-01 10 ×100ul 240
CC96182-02 100×100ul 1,938
DGF298 CC96158-01 10 ×100ul 5,000
CC96158-02 100×100ul 42,500
DH10B CC96101-01 10 ×100ul 240
CC96101-02 100×100ul 1,938
DH10B plus CC96193-01 10 ×100ul 240
CC96193-02 100×100ul 1,938
DH10B T1 CC96108-01 10 ×100ul 240
CC96108-02 100×100ul 1,938
DH10Bac CC96136-01 10 ×100ul 240
CC96136-02 100×100ul 1,938
DH12S CC96128-01 10 ×100ul 240
CC96128-02 100×100ul 1,938
DH5α CC96102-01 10 ×100ul 120
CC96102-02 100×100ul 1,020
EPI300 CC96163-01 10 ×100ul 500
CC96163-02 100×100ul 4,250
EPI400 CC96177-01 10 ×100ul 340
CC96177-02 100×100ul 2,745
GB05-dir CC96157-01 10 ×100ul 1,000
CC96157-02 100×100ul 8,500
GB08-red CC96156-01 10 ×100ul 1,000
CC96156-02 100×100ul 8,500
GB2005 CC96154-01 10 ×100ul 1,000
CC96154-02 100×100ul 8,500
GBred-gyrA462 CC96153-01 10 ×100ul 1,000
CC96153-02 100×100ul 8,500
GT115 CC96176-01 10 ×100ul 500
CC96176-02 100×100ul 4,250
HB101 CC96174-01 10 ×100ul 240
CC96174-02 100×100ul 1,938
INV110 CC96137-01 10 ×100ul 340
CC96137-02 100×100ul 2,745
INVαF CC96138-01 10 ×100ul 340
CC96138-02 100×100ul 2,745

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