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Rosetta 2 (DE3)pLysS感受态
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价格:¥电议
更新日期:2026/8/7 17:13:02
生 产 地:中国大陆
产品型号:CC96110
商家名片
张**
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详细内容
产品简介
Rosetta 2(DE3) pLysS 来源于 Rosetta(DE3),本菌株含有 pLysSRARE2 质粒,除了能够提供原
Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密码子的 tRNA 外,还
提供了第七个稀有密码子 CGG 的 tRNA。Rosetta2(DE3)pLysS 载体通过提供稀有密码子,使得该宿
主菌相对于其他大肠杆菌,能够提供更加“通用”的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平。DE3
是溶源性的 λDE3, 所以带有 T7 RNA 聚合酶的染色体拷贝,故而适用于 pET 系列载体及其他 T7 启
动子系列载体。该菌株含有 pLysSRARE2 质粒,除了提供稀有密码子外还能够产生 T7 溶菌酶,可
以有效降低目的基因的基础表达水平。同时,pLysSRARE2 质粒具有氯霉素抗性。此外,
pLysSRARE2 质粒的起始复制位点是 p15 Origin, 这使得该质粒能够和 pUC-及 pBR322-衍生的质粒
互相共存。经 pUC18 质粒转化检测, Rosetta 2 (DE3)pLysS 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg
DNA 以上。
产品组成
组分
Rosetta 2(DE3)pLysS
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLysSRARE2 (CamR)
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pLysSRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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