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Rosetta 2(DE3)感受态

Rosetta 2(DE3)感受态

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更新日期:2026/8/7 17:13:02

生 产 地:中国大陆

产品型号:CC96185

简单介绍:Rosetta 2(DE3)感受态
产品货号:CC96185

产品规格:10 ×100ul/100×100ul

产品价格: ¥ 电议

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详细内容

产品简介
Rosetta 系列菌株来源于 BL21 系列宿主菌,该系列菌株含有原本在大肠杆菌中稀少的真核细胞密码
子,增加了真核细胞的蛋白表达水平。Rosetta 2(DE3)来源于 Rosetta(DE3),本菌株含有 pRARE2 质
粒,除了能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密
码子的 tRNA 外,还提供了第七个稀有密码子 CGG 的 tRNA,这使得该宿主菌相对于其他大肠杆
菌,能够提供更加“通用”的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平。DE3 是溶源性的 λDE3 序列,
可表达T7 RNA聚合酶,因而适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列的载体。值得注意的是,
pRARE2 质粒具有氯霉素抗性。Rosetta 2(DE3)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC18 质粒检测转化
效率达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
Rosetta 2(DE3)
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB– mB–) dcm gal (DE3) pRARE2 (argU, argW, ileX, glyT, leuW, proL, argX)
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。






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