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EPI400 感受态

EPI400 感受态

点击次数:399

价格:¥电议

更新日期:2026/8/7 17:13:02

生 产 地:中国大陆

产品型号:CC96177

简单介绍:EPI400 感受态
产品货号:CC96177
产品规格:10 ×100ul/100×100ul

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张**
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详细内容

简要描述:GB2005 化转克隆感受态态产品简介
产品简介
EPI400 来源于 EC100 菌株,将 EC100 核基因中控制质粒拷贝数的 pcnB 基因改造成诱导型启动子驱
动后获得了 EPI400 菌株。EPI400 菌株可以显著降低大部分质粒的拷贝数,特别适合于各种含不稳
定 DNA 的质粒或含有毒性基因的克隆;在加入 CopyMore 400 诱导剂后可将质粒的拷贝数提高至正
常状态。mcrA 突变和 mrr-hsdRMS-mcrBC 缺失的基因型使得 EPI400 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧
啶或甲基腺嘌呤的 DNA 。recA1和 endA1突变有利于插入 DNA的稳定和高纯度质粒 DNA的提取。
lacZΔM15 标记的存在使 EPI400 可用于蓝白斑筛选,tonA 突变赋予其抗噬菌体 T1 和 T5 的能力,
rpsL 突变赋予其链霉素抗性。经 pUC18 质粒转化检测,EPI400 感受态细胞的转化效率可达 107
cfu/μg DNA。
产品组成
组分
EPI 化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL
(StrR) nupG trfA tonA pcnB dhfr
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。



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