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GB05-dir 感受态
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更新日期:2026/8/7 17:13:02
生 产 地:中国大陆
产品型号:CC96157
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张**
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详细内容
简要描述:GB2005 化转克隆感受态态产品简介
感受态细胞(competent cell):理化方法诱导细胞,吸收周围环境中的DNA分子,使其处于适摄取和容纳外来DNA的生理状态。
主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大,直观的说,使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。
产品组成
GB05-dir 感受态
产品货号:CC96157
产品规格:10 ×100ul/100×100ul
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。

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