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PIR2电转克隆感受态

PIR2电转克隆感受态

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价格:¥电议

更新日期:2026/8/7 17:13:02

生 产 地:中国大陆

产品型号:EC96132

简单介绍:PIR2电转克隆感受态
产品货号:EC96132

产品规格:10 ×50ul/100×50ul

产品价格: ¥ 电议

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详细内容

产品简介
Echo™ 克隆系统是一种双载体系统,利用噬菌体 P1 (1,2) 的 Cre-lox 位点特异性重组系统快速克隆到多个载体中。将您的目的基因克隆到门设计的供体载体中,然后根据需要与尽可能多的不同 Echo™ 受体载体重组。将供体和受体载体放置在包含 Cre 重组酶的缓冲液中 25 分钟,进行体外重组反应。CRE 结合了每个载体上的 lox 位点、将它们整合在一起、然后剪切并共价地重新连接 DNA 链。终结果是将供体和受体载体融合,形成一个单一功能表达载体。
建议将 PIR2 感受态细胞用于维持表达毒性基因的构建体或文库。使用这些用于克隆及维护您的供体载体构建体(或含有 R6K? 来源的其他载体)。它包含野生型 pir 基因
该基因可将载体维持在 ∼15 个拷贝/细胞。
仅限研究使用。不可用于诊断目的。
产品组成

PIR2电转克隆感受态

产品货号:EC96132

产品规格:10 ×50ul/100×50ul

存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
产品特性
  • 适用于在缺乏可选择或可筛选表型的基因内产生随机突变
  • 不需要大量的遗传或生物化学操作
  • 在没有可选择或可筛选表型的基因内产生随机突变
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。





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