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A549人非小细胞肺癌细胞培养方法
点击次数：245 发布时间：2023/3/23 9:46:12
A549人非小细胞肺癌细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系，患者为58岁白人男性。A549细胞能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
名称：A549人非小细胞肺癌细胞
年龄：男，58岁
来源：肺
特性：贴壁生长
形态：上皮细胞样
支原体：无
推荐传代比例：1:2-1:3
推荐换液频率：2~3次/周
冻存液：无血清冻存液，液氮储存
规格：1x10^6cells/T25或1mL冻存管
倍增时间：~22 小时
保藏机构：ATCC
培养条件气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
1
何时须更换培养基
视细胞生长密度而定，常规细胞2-3天更换培养基。
2
何时进行传代
细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
次传代建议1：2传代，就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
3
细胞冻存浓度是多少
1*10^6-1*10^7之间都可以。
4
冻存细胞数量计算
如果是有要求每管要冻多少细胞，那就用1ml完培重悬后，取部分按平时方法计数，剩下的细胞按计数需要的细胞量冻存即可。
如果没要求，那就按平时，一个皿冻一管。
5
离心速率应为多少
细胞传代或冻存时欲回收细胞，其离心速度一般为800-1000 rpm/min，室温离心5-8分钟，转速过高，将造成细胞破裂死亡。
6
可否使用与原先不同培养基
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，易造成细胞状态不好，终造成细胞无法存活。
7
可否使用与原先不同血清种类
不能。血清是细胞培养上一个为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
