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PC-12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)特征分析

点击次数:79 发布时间:2024/1/15 13:32:44
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PC-12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)特征分析 http://www.app17.com/c167644/products/d12229256.html

一、细胞基本属性
细胞名称PC-12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)
细胞别称PC12高分化;大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 高分化
种属来源大鼠
年龄性别雄性
组织来源肾上腺嗜铬细胞瘤
生长特性贴壁/悬浮
细胞形态成团状悬浮、半贴壁;小的形状不规则细胞
细胞代数 10代以内
背景介绍PC-12(高分化)细胞来自能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。这些细胞表达神经生长因子(NGF)受体。NGF可诱导产生神经表型。这些细胞不合成肾上腺素。
特别注意PC12高分化细胞呈漂浮成簇状生长,伴有少量松散贴壁的细胞,换液、传代时需小心保留漂浮生长的细胞。
使用权限A类
细胞规格1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测无
保藏机构 中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
培养基1640+5%FBS+10%马血清+P/S
培养条件气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件无血清冻存液,液氮储存
细胞货期2周左右
运输方式复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式T25瓶冻存管
收货处理观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养第三天换液并检查细胞密度
传代比例首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
传代方法a、收集PC12高分化细胞培养上清:抽出瓶中的培养基和悬浮的细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清,细胞重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
b、剩下贴壁的PC12高分化细胞,用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
c、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
d、按3mL/瓶补加培养基,轻轻打匀吹下细胞后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
e、将PC12高分化细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养中。
将含有1 mLPC12高分化细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查PC12高分化细胞密度。
注意事项

1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。

1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存;
2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。
到货须知

1.收到PC12高分化细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。

3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话: 按 2,我们随时给予解答。

原创作者:厦门逸漠生物科技有限公司

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