卵形拟杆菌的打管说明及注意事项

　　一、菌种简介

　　

菌种名称：卵形拟杆菌

　　

拉丁属名：Bacteroidesovatus

规格：冻干物

　　

其它编号：JCM5824=ATCC8483=CIP103756=DSM1896

　　培养基编号：177

　　培养温度：37℃,厌氧

　　培养时间：48小时

　　用途：研究

　　分离源：人的粪便

　　培养基信息

　　培养基编号：177

　　名称：EGmedium

　　备注：‘Lab-Lemco’powder2.4gProteosepeptoneNo.310.0gYeastextract5.0gNa2HPO44.0gGlucose1.5gSolublestarch0.5gL-Cystine0.2gAgar15.0gL-Cysteine·HCl·H2O0.5gHorseblood50.0mlDistilledwater1.0L添加L-胱氨酸到50毫升的1N盐酸调匀。加入剩余的组分，并把体积至950毫升调节pH至7.6⁻⁷.8。高压灭菌后，冷却至50℃后，在无菌条件下加入50.0毫升马血。调匀，倒入无菌培养皿或分发到无菌试管中。

　　注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

　　二、培养基

　　*TSA+5%脱纤维羊血（血琼脂平板）

　　三、保藏条件

　　安瓿瓶冻干菌种应在2-8°C保存。活化好的菌种要放厌氧环境下保存。

　　四、注意事项

　　1）冻干次活化，干粉要全部用完，不能预留，用0.1-0.2ml的培养液或无菌水溶解，接种在1个平板上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

　　2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

　　3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

　　4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为2-25年；

　　5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和质粒载体网联系。

　　五、单层冻干管打管说明书

　　1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

　　2、注意事项：菌种活化，请将安瓿管保存在4-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的，开启后必须一次使用完，不能留菌粉下次使用；另外，安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂，里面菌体为少数，复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上，否则可能造成复苏不成功；

　　3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态，有时延滞期较长，如在说明书建议的培养时间还未长起来，请继续在相应的环境下多培养24小时或者更长时间，直至菌种培养完成；有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长，一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。

　　4、暂不启开的安瓿管应于4℃中保藏（特殊除外）。

　　5、冻干管打开后需一次用完，不能留存。

　　6、打管操作需由业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。