细胞复苏、传代、冻存具体过程

　　1.把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。

　　2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。

　　3.把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。

　　4.标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。

　　5.3天换一次培养基。

　　二、传代

　　1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。

　　2.把原有培养基吸掉。

　　3.加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。

　　4.细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。

　　5.用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。

　　6.把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。

　　7.倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。

　　科研实验中，细胞的体外培养一直是一个重要环节。细胞要养好，就要用好血清，如Ausbian®特胎牛血清，它适合各种细胞培养，尤其适合难养细胞，如：干细胞、肝细胞，神经细胞，原代培养、细胞融合、转染细胞等。

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