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H8永生化人正常宫颈上皮细胞接收后的操作流程与注意事项

点击次数:162 发布时间:2023/3/7 14:43:58
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肖**
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  细胞名称:永生化人正常宫颈上皮细胞H8
  产品规格:T25培养瓶x1;1.5ml冻存管x2
  细胞数量:1x10^6;1x10^6
  保存温度:37℃;-198℃
  运输方式:常温保温运输;干冰运输
  仅供科研用途2类
  培养体系
  DMEM高糖培养基+10%FBS+1%双抗
  培养温度:37℃
  二氧化碳浓度5%
  简介
  永生化人正常宫颈上皮细胞H8细胞取自女性供体,经过SV40永生化处理。上皮样。
  参考文献
  四甲基吡啶卟啉-光动力疗法对人宫颈永生化上皮H8细胞的作用
  作者:宗丽菊[1]张友忠[1]王颉[1]吴淑霞[1]刘洪丽[1]张璐[2]刊名:山东大学学报:医学版
  H8(人宫颈上皮永生化细胞)接收后的操作流程与注意事项
  1.细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度,换液培养或传代。
  2.如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞及时离心,加15%血清的完,全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完,全培养基,培养2-3天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请及时联系实验室,技术人员会跟进解决。
  3.贴壁细胞生长缓慢:适当提高血清浓度(,高不超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养。
  4.生长不均:贴壁细胞若出现生长不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重新打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
  H8(人宫颈上皮永生化细胞)常规培养传代流程(请严格遵守无菌操作)
  1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加1~2 ml 0.25%EDTA的胰酶消化(注意把握消化时间,通常控制在1~2min)。
  2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁运动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml完,全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落、吹散。
  3.取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完,全培养基,于培养箱中培养。
  4.注意培养基PH值变化情况,定期换液,待细胞密度达到70-80%时重复传代操作或者冻存。
  H8(人宫颈上皮永生化细胞)特别注意:(如使用公共实验室或初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
  1.收到细胞后请尽快更换为含10%FBS的新鲜培养基,切勿使用原瓶中运输用培养基。
  2.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时拍照并联系实验室。
  3.细胞任何售后问题,均需拍照存档并及时联系客服。

原创作者:智立中特(武汉)生物科技有限公司

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