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MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶骨细胞亚克隆14)(种属鉴定正确)
点击次数：41 发布时间：2023/2/8 17:18:27
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产品信息
名称MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠颅顶骨细胞亚克隆14)(种属鉴定正确)
别称MC3T3-E1 SUBCLONE 14
种属小鼠
年龄（性别）新生
组织来源颅顶骨
生长特性贴壁细胞
细胞形态成纤维细胞样
背景描述从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆，从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14在抗坏血酸和3-4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3-E1 Subclone 24和MC3T3-E1 Subclone 30在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化，不形成ECM，可以作为MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14的阴性对照。矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA及唾液酸糖蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)和甲状旁腺激素/甲状旁腺激素相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质，表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1，一种成骨细胞相关转录因子。植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨，低分化细胞只是产生纤维组织。这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型，尤其是ECM信号。它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。
生物安全等1
生长培养基MEMα＋10%FBS＋1%P/S
推荐传代比例1:3-1:4
推荐换液频率2~3次/周
冻存条件冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮
培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
致瘤性Yes,in immunodeficient mice(forms bone-like ossicles).
基因表达情况collagen
保藏机构ATCC;CRL-2594
参考文献
文献列表
Composition ａnd bioactivity of calcium phosphate coatings on anodic oxide nanotubes formed on pure Ti ａnd Ti-6Al-4V alloy substrates(2020.03)
作者：Qianting Yao,Yingying Jiang,Shuo Tan
期刊：Materials Science ａnd Engineering:C
DOI：10.1016/j.msec.2020.110687
影响因子：5.88
．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：
将含有1mL细胞-5min，弃去上清液，完,全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完,全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完,全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完,全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
原创作者：智立中特（武汉）生物科技有限公司
