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探讨细胞培养过程中污染的种类及解决措施
点击次数：63 发布时间：2023/2/3 15:57:36
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肖**
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细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中核心、基础的技术。
细胞的生长需要一定的营养环境，用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。营养物和水一起，又叫细胞培养液，培养液中含有细胞增殖和生长所需要的各种物质。但同时这些物质也是微生物生长繁殖所需要的营养，难免会出现细胞污染的问题。
细胞培养污染有哪些种类?
一、细菌的污染
特征：大小在0.5~5μm，比动物细胞小很多。多呈球状或杆状，形态规则，分布均匀；增殖速度快，一般污染后48~72小时爆发式增殖；营养消耗快，培养基很快变黄，变浑浊；镜下观察有明显的定向运动。
二、真菌污染
特征：呈链球状或丝状。常形成肉眼可见的菌落，培养基颜色无变化或变紫，仅对局部细胞影响较大，其他地方生长正常。会形成孢子，容易污染其他细胞。
三、支原体污染
特征：小的微生物，无法通过光学显微镜看见，但可通过电镜观察到。感染支原体的细胞，在某一时间点碎片突然增多，随着传代，细胞状态显著变差。支原体污染可通过气溶胶传播，影响同一细胞房其他细胞。
四、黑胶虫污染
特征：无明确定义，镜下无法直接观察到。主要表现为细胞状态差，黑点和碎片多，布朗运动。通过检测发现主要为支原体污染，部分为未知的增殖不明显的微生物污染。
五、霉菌污染
特征：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37℃孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差。
六、病毒污染
特征：细胞胞状态变差，出现空泡化的现象。
七、噬菌体污染
噬菌体具有一般病毒所有的特征：为非细胞生物，其结构主要由蛋白质和核酸（DNA或RNA）组成；它们只能在活细胞内营性寄生，靠其宿主代谢补充，协助来复制核酸合成蛋白质等组分，然后再进行装配增殖。在离体条件下，能以无生命的化学大分子状态长，期存在并保持其侵染活性；非常一的寄生性，在自然环境条件下，它们只能侵染细菌和一些原生生物，而不能侵染高等生物和植物；对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感；个体小，可通过除菌滤器
噬菌体没有个体的生长过程，只有基本成分的合成和装配，所以一般将噬菌体的繁殖称作复制。
细胞一旦发现有污染出现，应及时对所用试剂和耗材进行清理。耗材可更换新的或者重新高压灭菌，试剂可重新过滤除菌或者更换新批次，操作台和细胞房需用消毒液进行全，面清洁消杀后方可复苏新的细胞，以免反复出现污染。
细胞培养房全，面消杀的工作，如果没有借助自动化消毒机恐怕会很费力气，浪费人力不说，还有可能会出现消毒不到位的情况，无法彻，底清除污染，存在反复污染风险。那么全自动消毒机用哪种方式比较好呢？
从事细胞培养工作多年的润联了解到，目自动化过氧化氢干雾消毒机形式多样，品类繁多，但水平参差不齐。做得比较好的技术成熟的有比林科汉，是细胞房消毒的路者，干雾技术十五年积累，中外结合，智能化全自动消杀，数字化管理，可视化消毒过程，看得见的效果。
并且突破性解决了过氧化氢消毒有腐蚀性的普遍问题，取代了VHP汽化过氧化氢、高温闪蒸、电离等高浓度腐蚀性方式，以进口比利时杀孢子剂为基础的高活性杀菌低浓度即可达到的效果结合比林科汉干雾消毒机，无与伦比的干雾扩散和自由布朗运动，无孔不入，不留任何污染的地方，实现更温和的消杀手段和更好的材料兼容性。
原创作者：智立中特（武汉）生物科技有限公司
