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N9(小鼠小胶质细胞)接收后的操作流程与注意事项
点击次数：52 发布时间：2022/11/8 11:27:11
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一、N9(小鼠小胶质细胞)简介
细胞名称小鼠小胶质细胞N9
产品规格T25培养瓶x1 1.5ml冻存管x2
细胞数量1x10^6 1x10^6
保存温度37℃-198℃
运输方式常温保温运输干冰运输
安全等1
用途限制仅供科研1类
培养体系DMEM高糖培养基+10%FBS+1%三抗
培养温度37℃二氧化碳浓度5%
简介小鼠小胶质细胞N9取自CD-1小鼠，贴壁培养
注释倍增时间32h
基因突变/
HLA信息/
STR信息/
参考文献PubMed=7681038;DOI=10.1002/glia.440070309Corradin S.B.,Mauel J.,Donini S.D.,Quattrocchi E.,Ricciardi-Castagnoli P.Inducible nitric oxide synthase activity of cloned murine microglial cells.Glia 7:255-262(1993)PubMed=21961028;DOI=10.2174/0148Crain J.M.,Watters J.J.Estrogen ａnd P2 purinergic receptor systems in microglia:therapeutic targets for neuroprotection.Open Drug Discov.J.2:148-167(2010)PubMed=22651808;DOI=10.1186/1742-2094-9-115Stansley B.,Post J.,Hensley K.A comparative review of cell culture systems for the study of microglial biology in Alzheimer＇s disease.J.Neuroinflamm.9:115-115(2012)
二、N9(小鼠小胶质细胞)接收后的操作流程与注意事项
1.细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度，换液培养或传代。
2.如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞及时离心，加15%血清的完，全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完，全培养基，培养2-3天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡，请及时联系实验室，技术人员会跟进解决。
3.贴壁细胞生长缓慢：适当提高血清浓度（，高不超过20%），或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养。
4.生长不均：贴壁细胞若出现生长不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重新打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
三、N9(小鼠小胶质细胞)常规培养传代流程（请严格遵守无菌操作）
1.吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加1~2 ml 0.25%EDTA的胰酶消化（注意把握消化时间，通常控制在1~2min）。
2.镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁运动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml完，全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。
3.取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完，全培养基，于培养箱中培养。
4.注意培养基PH值变化情况，定期换液，待细胞密度达到70-80%时重复传代操作或者冻存。
N9(小鼠小胶质细胞)特别注意：（如使用公共实验室或初次接触细胞培养，建议添加双抗培养）
1.收到细胞后请尽快更换为含10%FBS的新鲜培养基，切勿使用原瓶中运输用培养基。
2.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时拍照并联系实验室。
原创作者：智立中特（武汉）生物科技有限公司
