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HL-60细胞生长慢、状态差怎么办，如何预防？
点击次数：40 发布时间：2022/11/3 14:25:37
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细胞名称HL-60（人原髓细胞白血病细胞）
种属人
年龄（性别）女；36岁
组织来源外周血；早幼粒细胞；急性粒－单核细胞白血病
生长特性悬浮
细胞形态原粒细胞
背景描述HL-60细胞是一株早幼粒细胞；HL-60细胞源自一位患有急性粒-单核细胞白血病的36岁白人女性。HL-60细胞自发分化，丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、放线菌素D和视黄酸均可以促进分化。HL-60细胞表现出吞噬活性，并对趋化刺激有响应；HL-60细胞致癌基因myc表达阳性。
生长培养基IMDM＋20%FBS＋1%P/S
培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
HL-60细胞(人原髓细胞白血病细胞)是一株早幼粒细胞，源自一位患有急性粒-单核细胞白血病的36岁白人女性。
HL-60细胞自发分化，丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、放线菌素D和视黄酸均可以促进分化。HL-60细胞表现出吞噬活性，并对趋化刺激有响应；HL-60细胞致癌基因myc表达阳性。
养过HL-60的老师都知道，要想将这个细胞养好并不容易，细胞生长慢、状态差是较常遇见的问题，,天普诺赛教您如何解决并预防。
解决方法
当细胞传代后生长速度慢且状态不佳时，可竖着培养直到培养基变黄，待细胞密度起来后，状态会有所好转。
同时，若HL-60细胞状态很差，可采用半换液的方式：
以T25瓶子为例，瓶子里有5mL培养基，竖起瓶子静置一段时间（竖瓶拍拍瓶子，让轻贴底部的细胞团浮起来），待细胞沉底（肉眼观察细胞沉底情况），小心吸出2.5mL的培养基，转移到离心管，离心1000rpm 3~5min，用2.5mL新鲜培养基重悬后再放回原瓶。
预防方法
要想将HL-60细胞养的更好，不仅要学会解决问题的方法，更要懂得如何预防。小普将从以下五点教您如何预防此类问题的出现：
HL-60细胞在高密度下状态比较好，细胞状态好时会吸收一些细胞碎片；
低密度时细胞状态很差，传代比例要控制，当培养密度达到1x106/mL左右时可传代，细胞状态不好时后面传代可以不用离心；
DMSO会对HL-60刺激分化，建议复苏马上离心去除DMSO；
悬浮细胞对血清要求高，选用优,质血清培养；
培养过程中尽量不动或少动培养瓶。
原创作者：智立中特（武汉）生物科技有限公司
