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培养大鼠角膜上皮细胞这些功能和处理方法不得不了解
点击次数:41 发布时间:2022/11/2 10:10:19
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细胞详述
角膜位于眼球壁的一层透明膜,约占纤维膜的1/6,从后面看角膜呈正圆形,从面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不同,中央部薄。角膜分为五层,由向后依次为:上皮细胞层、弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。
角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完,全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
角膜上皮细胞分离自眼角膜组织;角膜位于眼球壁的一层透明膜,约占纤维膜的1/6,从后面看角膜呈正圆形,从面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。
角膜上皮细胞主要功能如下:
1、角膜是无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞。
2、角膜上皮细胞能参与先天性免疫,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统。
3、角膜上皮细胞能高,效表达醛脱氢酶。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。
大鼠角膜上皮细胞细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。24小时后换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
另外关于大鼠角膜上皮细胞传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。
原创作者:智立中特(武汉)生物科技有限公司


