技术文章
细胞又污染了，莫慌，帮您拯救珍贵细胞！
点击次数：62 发布时间：2022/10/17 12:29:11
商家名片
肖**
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 18******396
- 手机: 18******396
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
在细胞培养过程中，广大科研工作者一直饱受微生物污染的困扰，几乎所有科研单位的细胞房都曾经遭受过细菌、真菌、支原体、黑胶虫的污染，尤其是一些珍贵的细胞种子，一旦招惹上这几个家伙，甚至面临“绝种”的危险。针对细胞培养当中面临的普遍的问题，作为科研工作者的我们必须清楚认识这些微生物，并通过技术手段判断细胞遭受了哪种污染，准确的对症下药，才能为我们的细胞保驾护航。
1细菌污染
1.1细菌污染的鉴别
细菌污染是细胞培养当中常出现的污染类型，枪头不小心碰到瓶壁、手不小心从培养瓶口处穿过、培养基倒入培养瓶等等，不经意的一个小动作，都可能会造成细菌污染，以致于实验功尽弃。
细菌污染在没有爆发或培养体系中含有双抗时，细菌污染较容易被科研工作者忽视，黑点在显微镜下一穿而过，小黑点因为数量少且移动迅速而不易发现。随着细菌在培养体系中的增多或者体系中撤掉双抗以后，细菌可以从镜下明显识别，会呈现黑色条状、棒状、球状，培养基的外观也会发生明显的变化，培养基变浑浊，有细沙状沉淀，有时会伴有臭味。
1.2细菌污染的解决方式
一般的细胞培养体系中，普遍采用双抗或者三抗进行细菌的预防，但这两者存在一定的局限性，比如只能预防，而不能拯救已经细菌污染的细胞。另外，很多科研工作者从事原代的细胞分离和培养工作，在从动物身上取材并分离培养的过程中，易造成细菌污染，如果只是加入双抗或三抗进行冲洗组织，细菌污染无法避免，造成了珍贵动物组织的浪费。
2.1真菌污染的鉴别
实验室污染的真菌一般为三类：念珠菌、酵母菌、霉菌，细胞污染真菌通常不易察觉，只有霉菌会逐渐出现细丝团状漂浮物，较容易从外观发觉污染，其他真菌污染不像细菌污染培养基会浑浊，污染后培养液清澈透亮，与未污染的细胞从外观上看无明显变化。在显微镜下比较容易判断污染类型，念珠菌呈卵圆状，在细胞周边生长，酵母菌出芽生殖时有明显的一大一小连体结构，霉菌可观察到菌体，菌丝呈丝状、管状、树枝状。
2.2真菌污染的解决方式
真菌污染由于不容易通过培养基的变化来判断，一般发现时就是已经爆发了，镜下会出现明显团状或黑色丝状污染物，细胞状态明显变差，很难救活。传统的预防真菌污染的方式为培养体系中加入三抗，但是一旦发生真菌污染，三抗对于明显的真菌污染就显得心有余而力不足，此时建议如果是还留存种子的细胞就立刻扔掉，彻,底消毒灭菌细胞房和CO2培养箱，扔掉可能被污染的培养基，对用过的实验器材进行灭菌。
3黑胶虫污染
3.1黑胶虫污染的鉴别
“黑胶虫”是一种常见的细胞污染物，与细胞共生，随细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长，对细胞生长不利，严重时导致细胞死亡。目很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象，对细胞培养及其后续实验造成了大地影响。“黑胶虫”污染的细胞常见的特性有以下几点：（1）培养基不浑浊，但在显微镜下观察细胞时，细胞周围和培养液中有很多“小黑点”，且随着培养时间的延长“小黑点”逐渐增多，更换培养液或洗涤细胞不能将其去除；（2）“黑胶虫”污染的细胞，营养消耗快，需要频繁更换培养液；（3）“黑胶虫”污染的细胞生长缓慢，细胞状态差，空泡化严重，甚至还可能导致细胞形态的改变。
3.2黑胶虫污染的解决方式对于黑胶虫污染的细胞，为快速有效的处理方式就是采用黑胶虫清除剂对黑胶虫进行清除，同时确保培养体系中的血清必须为无黑胶虫和原虫污染的优,质血清。
推荐黑胶虫清除剂
黑胶虫清除试剂用于清除细胞培养过程中产生的“黑点”，只需1-3天就可以显著抑制“黑点”生长，一周左右即可清除“黑点”。
本产品经过了上百种细胞的测试和长,期的实验验证，对细胞生长无明显影响，具有高,效、特异性杀灭的特点，可显著清除黑胶虫污染，大程度上挽救珍贵的细胞。
4支原体污染
4.1支原体污染的鉴别
支原体直径约为0.1-0.3μm，具有变形能力，可透过常见过滤膜（0.22-0.45μm），因此常规的无菌过滤方法不能将其去除，常用的抗生素也对支原体无效。支原体污染是细胞培养域的一个性问题，各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体可通过细胞之间交叉污染，操作人员的口腔、皮肤造成污染，或者血清等添加物而带入污染。
支原体在光学显微镜下不可见，一般不会引起培养物混浊，因此细胞被支原体污染一
般难以察觉。支原体会消耗必需氨基酸，影响细胞生长速率，促进代谢物积累，改变细胞
形态，影响DNA、RNA以及蛋白质的合成，抑制细胞因子表达，改变被污染细胞的基因
表达谱，诱导染色体畸变。
原创作者：智立中特（武汉）生物科技有限公司
