智立中特BIU-87人膀胱癌细胞背景描述

　　种属人年龄（性别）

　　组织来源

　　生长特性贴壁

　　细胞形态上皮细胞样

　　背景描述:BIU-87细胞是由俞莉章等建系于1989年；BIU-87细胞来源于人膀胱乳头状移行上皮癌，通常采用5×10^8细胞、0.2ml的接种体积接种至裸鼠皮下；BIU-87细胞呈进行性肿瘤生长，肿瘤结节病检与原标本癌组织相似。BIU-87细胞22代群体倍增时间为34小时；BIU-87细胞能在软琼脂上生长，克隆形成率23%。BIU-87细胞对ConA、WGA、PSL均有凝集反应。

　　生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S

　　培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

　　人膀胱癌细胞（BIU-87）培养步骤

　　一．人膀胱癌细胞（BIU-87）培养基及培养冻存条件准备：

　　1）RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

　　2）培养条件：Atmosphere:Air,95%;CO2,5%，Temperature:37℃。

　　3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

　　4）Medium Renewal：every 2 to 3 days

　　二．细胞处理：

　　1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

　　2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

　　对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

　　1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

　　2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

　　3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

　　4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

　　细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。