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MLTC-1小鼠睾丸间质细胞瘤细胞生长方法
点击次数：40 发布时间：2022/10/8 13:28:40
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细胞名称MLTC-1（小鼠睾丸间质细胞瘤细胞）
种属小鼠
年龄（性别）雄
组织来源睾丸；Leydig细胞；Leydig细胞瘤
生长特性贴壁
细胞形态上皮细胞样
背景描述MLTC-1细胞是从C57BL/6小鼠移植的M548OP Leydig细胞肿瘤中建立；MLTC-1细胞保留了原始肿瘤对激素的反应。在人绒毛膜促性腺激素(hCG)、黄体激素、霍乱毒素、氟化钠和脒基-5＇-亚氨基二磷酸盐处理下，MLTC-1细胞的膜腺苷酸环化酶活性提高；在hCG作用下，MLTC-1细胞还可生成黄，体，酮。
生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S
培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
MLTC-1(小鼠睾丸间质细胞瘤细胞)收货处理方法:
贴壁生长的细胞:
1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开包装T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。
3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。
5、如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。
悬浮生长的细胞:
1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货,拆开包装离心管的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
2、然后用显微镜观察细胞状态。
3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。
4、平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清。
5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。
MLTC-1（小鼠睾丸间质细胞瘤细胞）操作说明：
1)对于常温运输的细胞，收到细胞后，检查是否有运输问题，即细胞培养瓶或管是否破损，细胞培养液是否溢出。若没有运输问题，请75%酒精消毒后，保留封口膜，放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数：温度，湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后，细胞状态稳定后，即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系，A2780(人卵巢癌细胞)严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许，培养的三天内做细胞拍照记录，通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。
2)对于干冰运输的细胞，请取出冷冻管后，须立即放入37C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。然后将其复苏培养，次日更换培养液。
MLTC-1（小鼠睾丸间质细胞瘤细胞）注意事项：
1)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。
2)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保，证细胞的状态和生长速度。
3)对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。
原创作者：智立中特（武汉）生物科技有限公司
