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细胞培养的意义及常用细胞培养基介绍
点击次数：38 发布时间：2022/9/6 9:14:12
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肖**
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细胞培养的意义
⒈可以进行植物体外受精及植物胚胎发育过程研究。
⒉可以进行植物生长发育有关的重要基因或影响因素的研究。
⒊可以方便地通过实验手段培育植物新品种。
细胞培养基的产品
⒈BME（basalmediumeagle）基础伊格培养基
⒉MEM
⒊DMEM
⒋IMDM
⒌RPMI-1640
⒍M199
⒎Mccoy＇s5A
⒏F10\F12\DMEM混合F12（三）几种常用细胞培养配套试剂的配置（缓冲液、平衡盐溶液等）
1、无钙、镁、离子溶液（1000ml)
氯化钠（NaCl)8g磷酸二氢钠、（NaH2PO4H20）0.05g、氯，化，钾（KCl)0.2g、碳酸氢钠（NaHCO3）1g、柠檬酸三钠(Na3C6H5O7,H20）1g、葡萄糖1g、加去离子水或双蒸水至1000mL
2、PBS（Phosphate-Bufferedsaline）磷酸盐缓冲液
甲液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、磷酸氢二钠（无水）28.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL
乙液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、磷酸二氢钠（无水）2.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL
甲、乙液于4℃保存，使用时按表3-2所示比例，配制成所需pH浓度，高压灭菌后室温保存。
3、Hanks液（HBSSHank‘sBalancedsaltsolution)
⑴母液甲（20x）配法
①NaCl(A.R)160g、KCl(A.R)8g、MgSO4.7H2O（A.R)2g、MgCl.6H2O(A.R)2g依次溶于800mL双蒸水中，一物质溶后再加后一种。
②CaCl2(A.R)2.8g溶于100mL双蒸水中，溶时不断搅拌（此液应单配，单溶）。
待上述两溶液中的“溶质”全溶后，将它们混合，再用双蒸水补至1000mL，向其中加2mL氯，仿作为防腐剂，置4℃保存。
⑵母液乙（20×）配法
①Na2HPO4.12H2O(A.R)3.04g、KH2PO4(A.R)1.20g、葡萄糖（A.R)20.0g溶于800ml双蒸水中。
②0.4%酚红液0.4g酚红放在玻璃研钵后加0.01N、NaOH11.28mL，直到全部溶解，移入100mL容量瓶中，加水至100mL，过滤，pH为7.4，4℃保存。
待上述各“溶质”完，全溶解后，用双蒸水补至1000mL,其中加氯，仿2mL作防腐剂，置40℃保存。
3）使用液（1×）配法
取母液甲和母液乙各一份，加双蒸水18份，分装后，塞好瓶塞，挂上标志。以115℃高压灭菌25分钟（以免葡萄糖破坏），置室温后4℃保存，可使用几个月。临用，用7.5%NaHCO3调至所需pH。
4、Eagle＇s液（EBSSEagle＇sBalancedsaltsolution)
是一种在二氧化碳（CO2）环境中短期维持细胞活性的平衡盐溶液，可用于细胞解离的清洗、细胞或组织的运输、细胞计数时稀释、溶液的配置等。
5、HEPES液
生物缓冲液，化学性质稳定，在PH7.2~7.6范围内，比NaHCO3缓冲液的缓冲能力更强。
6、NaHCO3缓冲液
常规缓冲体系的一部分，但是不稳定，易受空气中CO2的含量而改变PH值，影响缓冲效果。
原创作者：智立中特（武汉）生物科技有限公司
